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HEA是蝉花虫草的活性成分之一,是一种天然的钙离子拮抗剂和腺苷A1受体激动剂。钙离子拮抗剂常用于心血管疾病的治疗,但有关HEA降压效果的研究目前还未见报道。本实验对HEA降压机制和代谢机制进行研究,从HEA提取、动物实验、代谢分析和HEA与HSA结合实验入手,利用生化及分子生物学方法展开实验,主要研究结果如下:HEA的提取分离:利用水提醇沉法去除多糖,蒸馏浓缩去除沸点不同的杂质,将浓缩液通过大空树脂再次去除大分子物质,检验合并后冷冻干燥得到乳白色粉末,利用液相继续分离HEA和虫草腺苷,结果表明,HEA在10 min左右出峰,利用标准曲线计算HEA的纯度达到95%以上。HEA对造模大鼠的降压作用:通过灌胃L-NAME 10mg/kg三周对SD大鼠进行高血压模型,两周后造模大鼠收缩压达到140 mmHg以上,舒张压达到90mmHg以上,设置HEA 2.5mg/kg、5mg/kg、7.5mg/kg浓度组给药,DPCPX检测HEA对A1R激动作用。实验结果表明HEA对高血压大鼠具有降压作用。HEA对自发性高血压大鼠的降压作用:SHR大鼠分组,另加SHR对照组和WKY空白对照组,腹腔注射给药四周后进行相关实验。血压测量表明HEA低中浓度降压效果明显,但低浓度组降压效果稳定性不如中浓度组;血清生化指标实验表明HEA可以通过降低血液中尿素氮/肌酐值修复高血压性肾损伤;HEA降压机制可能是通过调节MAPK通路上相关受体,下调ERK1/2蛋白表达量和上调eNOS蛋白表达量,同时降低炎性因子IL-6和TNF-α的含量,WB实验对大鼠心肌组织实验和ELISA血清实验中,证明了以上机制的假设。HEA对高血压大鼠肠道微生物的影响:取SHR大鼠给药后的粪便进行微生物多样性研究。高通量测序法从物种多样性、物种组成、样本比较等方面,研究HEA对高血压大鼠肠道微生物的影响,证明了HEA可以通过提高肠道内有益微生物的丰富度来改善高血压;使用GC-MS的方法研究高血压大鼠肠道微生物的组成的功能,分析是否给药对高血压肠道微生物的影响,通过差异代谢物筛选进行代谢通路分析,找到差异物在各部分通路中的作用。这一部分可以多角度深层次研究HEA与肠道微生物的内在关系。HEA与HSA的相互结合:通过荧光光谱、同步荧光光谱、三维荧光光谱和分子对接方法,对HEA与HSA之间的结合过程进行了系统地研究,结合本实验,可以有效探究HEA进入体内与HSA的结合过程以及作用部位,进一步探究了HEA在体内的存储、运输、传递等机制,为HEA降压机制的化学层面分析提供了基础。综上所述:HEA对高血压大鼠具有显著的降压效果,动物学与分子生物学实验表明HEA降压效果是通过激活A1R,降低炎症因子含量,上调eNOS和下调ERK1/2蛋白表达量,进而调节MAPK通路实现。降压机制还与微生物多样性的改变和靶标代谢差异物有关。HEA与人HSA的相互作用,揭示了HEA在体内的传输机制,为蝉花虫草的开发利用提供参考。