卵黄免疫球蛋白,又称卵黄抗体,是禽类血清中的IgG进入到卵黄中而形成的一类免疫球蛋白。由于鸡属于非哺乳动物,与人类亲缘关系较远,因此对人类的病原体及哺乳动物高度保守蛋白质能产生强免疫应答。另外,IgY的热、酸稳定性好,4℃保存5年或室温放置6个月,抗体活性仍无明显下降。这种鸡源的特异性多克隆抗体（IgY）选材方便、提取较易、又可规模化生产,在食品及口服被动免疫治疗领域有着巨大的应用前景。隐孢子病是由隐孢子虫引起的一种以腹泻为主要临床表现的人兽共患原虫病。呈世界性分布,已经被列为最常见的6种腹泻病之一。多年来虽然国内外学者对隐孢子虫病的防治研究作了很多工作,但尚未筛选出一种特效药物治疗隐孢子虫感染。因此仍有必要对隐孢子虫病的防治做进一步的研究。本研究的目的是制备抗隐孢子虫特异性卵黄抗体,并初步探讨其对隐孢子虫病的防治作用。利用实验室保存的鸡源隐孢子虫卵囊,以改进的Sheather蔗糖梯度离心法提纯卵囊,低速离心结合滤膜微滤除菌后,通过反复冻融和超声波处理的全卵囊抗原,以福氏完全和非完全佐剂制备免疫抗原,采用抗原增加的梯度免疫法对健康鸡进行免疫,共免六次;酸化水稀释-盐析法分离纯化卵黄抗体,并比较各盐析法提纯卵黄抗体的效果。建立了检测抗隐孢子虫特异性卵黄抗体的间接ELISA方法,并通过ELISA系统检测了抗体效价,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）鉴定纯度,紫外分光光度法测定其蛋白浓度。结果显示:水稀释二步硫酸铵盐析法取得了良好的提纯效果,蛋白浓度为9.44mg/ml,每枚鸡蛋最低可提供大约94.4mg抗体。采用间接ELISA对获得的卵黄抗体进行鉴定。其具有隐孢子虫属特异性。SDS-PAGE结果显示,IgY与血清IgY具有同源性,是从血清中转移到卵黄中的免疫球蛋白。间接ELISA方法测定IgY的稳定性,将IgY放置在不同的环境条件下:①将IgY放入25℃-80℃水浴中加热15min后取出,测定效价;②调不同pH值,置37℃恒温箱孵育2h,取出以NaOH和HCL再分别将样品的pH值调至7.2～7.4,测定抗体样品的效价。IgY在pH4～10活性无明显变化;在65℃时活性无影响。表明IgY具有良好的稳定性,为临床应用提供了可靠的依据。应用本实验研制出的抗隐孢子虫特异性IgY,防治雏鸡隐孢子虫感染,试验分七组:空白对照、感染组、阴性IgY治疗组、抗贝氏隐孢子虫抗体（IgY）治疗组、抗牛安氏隐孢子卵黄抗体（IgY）高、中、低治疗组,灌喂抗体第2天感染C.baileyi卵囊3.2×10⁶个·只^-1。观察各组卵囊的变化情况、临床症状、法氏囊指数、对增重的影响。结果表明:阴性治疗组与感染组在潜隐期、高峰期、持续期（20d）、基本一致,但排卵囊强度阴性IgY治疗组较感染对照组稍有降低。阴性IgY治疗组与牛安氏隐孢子虫特异性IgY抗体治疗的三个不同剂量组进行比较,3个治疗组均在第12d达到排卵囊高峰,卵囊排出量较阴性IgY治疗组低,其中高剂量治疗的降低幅度最大,在卵囊持续期的长短等方面:牛安氏IgY抗体低剂量治疗组从感染后第3d开始排卵囊,卵囊排出数量较阴性IgY治疗组平均低12%,排卵囊持续期19d,比阴性IgY治疗组少了1d;中剂量治疗组卵囊排出数量较阴性IgY治疗组平均低28%,排卵囊持续期18d,比阴性IgY治疗组少了2d;高剂量治疗组卵囊排出数量较阴性IgY治疗组平均低43%,排卵囊持续期18d,比阴性IgY治疗组少了2d;表明应用牛安氏隐孢子虫特异性IgY抗体预防和治疗可使卵囊的排出的数量减少,持续期减短。从另一侧面反映出对卵囊的抑制作用。且呈剂量相关性。抗贝氏隐孢子虫的特异性高免卵黄抗体（IgY）治疗组与牛安氏隐孢子虫特异性IgY抗体治疗的三个不同剂量组进行比较:卵囊排出数量较三个治疗组平均低45%,排卵囊持续期18d。表明抗贝氏隐孢子虫的特异性高免卵黄抗体（IgY）在实验动物人工感染治疗试验中显示良好的疗效,能显著减少鸡群OPG值。本实验成功制备出的高活性的抗隐孢子虫特异性IgY,对提高雏鸡免疫功能、特异性防治隐孢子虫感染具有明显的作用。且牛安氏隐孢子虫特异性IgY抗体对鸡源贝氏隐孢子虫病具有交叉保护作用。