桑蚕蛹营养组成、蛹油抗氧化及降脂活性的研究

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本文以桑蚕蛹为研究对象,对蚕茧贮藏期四个阶段的蚕蛹形态、体内蛋白质组分、脂肪酸成分变化,以及蚕蛹油(Silkworm pupa oil,SPO)的体外抗氧化活性进行分析;并探讨缫丝蛹油的体内抗氧化作用机理以及体内降脂机理。以期为提高桑蚕加工副产物——缫丝蚕蛹的附加值提供理论依据。主要研究结论如下:(1)蚕蛹的形态、蛋白质组分及脂肪酸组成、蛹油活性受蚕茧贮藏时间影响。随着贮藏时间的延长,蚕蛹的质量、油脂含量呈下降趋势;主要蛋白质分子量范围~30 k Da和~70 k Da的蛋白质含量降低,缫丝蚕蛹中~70k Da蛋白质含量丰富比贮藏期的蚕蛹含量高,第一限制氨基酸为亮氨酸;SPO中棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸和α-亚麻酸含量高且在贮藏期内变化显著(P<0.05),缫丝SPO的α-亚麻酸含量(30.46±1.18%)高于贮藏期的SPO(26.03±0.28~28.49±1.84%);贮藏期蛹油的DPPH自由基和ABTS+·清除率的IC50范围分别为20.93~52.00 mg/m L和33.32~156.81 mg/m L,其体外抗氧化活性可能与其总酚含量(15.95±0.28~77.50±1.58 mg/kg oil)变化有关。(2)缫丝SPO的体内抗氧化活性研究。缫丝SPO对于秀丽隐杆线虫无毒害作用,且不会对其运动行为产生负面影响;与对照组相比,SPO对于野生型秀丽隐杆线虫的寿命延长率提升了11.91%~18.03%,对于胡桃醌诱导的氧化损伤保护作用呈现剂量依赖性。给药72 h后,低中高SPO实验组中线虫的ROS含量呈现剂量依赖性降低,这可能与SPO提高线虫体内T-SOD酶活力(分别提高13.51%、73.52%和108.82%)和CAT酶活力(分别提高26.52%、41.61%和11.43%),降低MDA含量(分别下降23.65%、20.91%和3.42%)有关。通过实时荧光定量PCR检测了抗氧化基因的m RNA表达水平,发现在正常生理条件下,SPO实验组分别上调了sod-2、daf-2和skn-1的m RNA表达水平,分别为1.13倍、1.27倍和1.39倍,下调了sod-3和ctl-2的m RNA表达水平,分别为59.1%和18.5%,SPO对于daf-16的m RNA表达无显著影响(P>0.05)。(3)缫丝SPO体内降脂活性研究。SPO以剂量依赖型降低高脂线虫模型的甘油三酯含量。与模型对照组相比,0.05mg/m L、0.1 mg/m L和0.5mg/m LSPO饲喂的实验组中,线虫甘油三酯分别降低了21.73%、39.07%和51.85%。经实时荧光定量PCR检测脂代谢相关基因的m RNA表达水平发现,SPO可以降低fat-5、fat-6、fat-7、nhr-80和acs-2的m RNA表达水平;上调age-1、tph-1的m RNA表达;但对mdt-15和sbp-1的表达无显著性影响(P>0.05)。SPO的降脂调节可能与age-1、tph-1、nhr-80途径有关,并且可能通过nhr-80调控三个脂肪酸去饱和酶的表达。
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