许氏平鲉选育群体生长规律、遗传特征分析及亲本贡献率研究

来源 :上海海洋大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiaowangdoc
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许氏平鲉因具有肉质细嫩、味道鲜美、繁殖能力与适应性强、洄游范围小、自然越冬等优点,现已成为我国北方沿海网箱养殖、休闲垂钓、增殖放流的主要经济鱼类之一,并随着海洋牧场的大力发展,成为增强海洋生物多样性首当推崇的鱼类品种之一。随着近些年过度捕捞和海水污染等问题,野生资源骤减,严重影响到许氏平鲉野生群体遗传多样性,同时养殖企业对许氏平鲉生长快的优良苗种需求量巨大,亟需开展人工良种选育工作。本研究首先构建群体选育群体和家系选育群体,从其早期生长发育规律、形态性状对体质量的通经与灰色关联分析等方面,探讨生长规律变化并评估其生长性能,明确三代选育的理想经济性状,为选育目标确立提供参考依据;其次通过已开发的微卫星分子标记对选育后代的遗传多样性及遗传结构进行分析,为选育快速生长许氏平鲉新品系提供基础资料;最后构建许氏平鲉微卫星多重PCR体系并对亲本贡献率进行研究,分析其雌雄交尾模式及父本对子代的贡献率,为开展人工繁育和良种选育提供科学理论依据。一、许氏平鲉三代选育群体早期生长发育规律及曲线拟合为研究许氏平鲉三代选育群体早期生长发育规律,本研究对三代选育群体1-8月龄的生长性状进行测量,首先利用幂函数的方法对许氏平鲉体质量和体长生长关系进行了分析,其次运用3种动物生长模型(Logistic、Gompertz和Von Bertalanffy)分别对三代选育群体生长性状进行非线性曲线拟合分析。结果表明:(1)许氏平鲉选育三代(F1、F2、F3)体质量与体长的相关关系分别为:W1=0.031L2.937,R2=0.997;W2=0.038L2.787,R2=0.997;W3=0.031L2.900,R2=0.998,这三条曲线拟合度较高。(2)运用3种生长模型分别拟合体质量和体长,发现Von Bertalanffy生长模型对许氏平鲉三代选育群体体质量的拟合效果最好,拟合值和实际测量值的相关指数R2分别为0.996、0.997、0.998,Gompertz生长模型对体长的拟合效果最好,R2分别为0.994、0.998、0.996。(3)三代选育群体体质量在各自最适模型下的拐点月龄分别为7.456、6.671和4.828月龄,拐点体质量分别为34.262、33.195和26.399g。体长在各自最适模型条件下的拐点月龄分别为2.294、2.444和2.548月龄,拐点体长分别为4.284、4.629、5.192cm。这一结果可为许氏平鲉下一步的新品系选育和养殖提供理论基础。(4)在成活率上,三代选育群体差异不显著(P>0.05);在肥满度、平均增重率和平均生长率方面,F3生长优势明显,可作为进一步的选育材料。二、通径分析与灰关联分析本研究在许氏平鲉连续选育三代8月龄时随机选取80尾,分别测量体质量(Y)和全长(X1)、体长(X2)、体高(X3)、头长(X4)、尾长(X5)、尾柄长(X6)、尾柄高(X7)、吻长(X8)、躯干长(X9)、眼径(X10)、眼后头长(X11)共12个性状指标,采用通径和灰色关联分析两种方法对许氏平鲉三代选育群体的11个形态性状对体质量的影响效果进行研究。结果表明,(1)三代选育群体各形态性状间及与体质量的相关关系均到达极显著水平(P<0.01)。(2)通径分析结果显示:F1、F2代的体高和躯干长对体质量的通径系数达到显著水平(P<0.05),总决定系数分别达为0.936、0.943;F3代的体高和尾柄长对体质量的通径系数达到显著水平(P<0.05),总决定系数为0.893。建立许氏平鲉三代选育群体的最优线性回归方程,F1:y=-47.383+17.097X3+7.308X9;F2:y=-34.615+15.779X3+3.901X9;F3:y=-54.496+21.966X3+7.283X6。(3)灰色关联度分析结果表明,F1、F2、F3体质量与形态性状的关联度大小排在前三位的均为体高、全长、体长,三代中体高与体质量的关联度最高。通径分析得到的形态性状对体质量的直接作用大小及次序与灰色关联分析得到的关联度有所不同,但两种方法排名在第1位的主控性状均为体高。表明可以参照体高这一性状作为许氏平鲉选育的重要评价指标,以提高选择效率。本研究明确了许氏平鲉选择育种的理想选育目标性状,同时拓展通径分析与灰关联分析法协同使用的方法在水产动物选择育种研究中的应用。三、许氏平鲉(Sebastes schlegelii)速生选育群体遗传特征分析本研究为开展许氏平鲉遗传改良和优质新品系选育,选取荣成(R)和长岛(C)的野生许氏平鲉为基础群体,采用群体选育(群体内和群体间)和家系选育相结合的方法,获得R-F1、RC-F1 2个群体选育群体和R-F2、RC-F2、R-F3、RC-F3 4个家系选育群体。利用20对高多态性的微卫星标记对8个群体进行遗传多样性检测。结果表明:20对微卫星位点在所有群体中均表现出较高多态性,8个群体的平均有效等位基因数为2.9849-7.9598,平均观测杂合度和期望杂合度分别为0.7230-0.8405和0.6315-0.8716,平均多态信息含量为0.6472-0.8478。经两代家系选育的R-F3和RC-F3平均等位基因数显著降低,但观测杂合度(Ho)和期望杂合度(He)均值仍达到0.7230、0.7549和0.6527、0.6315,还维持了较高的遗传多样性水平,遗传潜力较大。Hardy-Weinberg平衡检测结果和遗传偏离指数(d)表明各群体在大约10个位点上表现出一定程度的杂合子缺失现象。群体间平均遗传分化系数(Fst)为0.1279,各群体间存在中等遗传分化程度。R与R-F1分别与RC-F3遗传距离最远(0.9959、0.9848),预测利用两组群体中生长优良个体分别进行杂交育种有可能获得杂种优势。四、许氏平鲉微卫星多重PCR体系建立及亲本贡献率研究本研究选取10尾雌鱼、10尾雄鱼,置于同一养殖池内自由交尾,有四尾雌鱼顺利产仔。利用本实验室开发的13对高多态性微卫星标记或位点,基于扩增片段大小、退火温度、引物浓度、反应体系等进行优化组合,成功构建了构建3个三重和2个两重PCR反应体系,运用CERVUS 3.0软件对4个母本及10个候选父本及376个子代进行亲权鉴定,探究交配模式和父本对子代的贡献率。结果表明:当双亲基因型已知的情况下,当利用5组多重PCR反应体系时,累积排除率达到0.999999以上,亲子鉴定准确率达到100%,可有效鉴定许氏平鲉4个家系的亲权关系;鉴定到父本数为3-6,♀Fe1-Fe4家系子代中,父本数依次为为6、5、4、3个,♂2和♂7参与到4个母本受精交配中,♂3、♂4、♂5和♂10均参与了2个雌性的交配过程中,存在“一雌多雄”和“一雄多雌”的交配模式。在所有子代中,父本贡献率最高为♂7(32.45%)>♂2(19.15%)>♂6(16.22%),贡献率总和达到67.82%。其中♂1和♂9未发现子代,说明未参与受交配或交配受精不成功,其贡献率为0。可以为人工繁育和良种选育提供科学理论依据。
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