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目的研究脂多糖(LPS)刺激能否诱导正常人肝内胆管上皮细胞(HIBECs)白细胞介素-6(IL-6)/信号转导与转录激活因子3(STAT3)信号通路的激活及对该信号通路下游因子c-Myc和髓样细胞白血病-1(Mcl-1)表达的影响;探讨LPS对HIBECs细胞增殖的影响及其可能存在的机制。方法(1)HIBECs细胞常规体外培养,使用不同浓度的LPS(0、0.1、1、2、4、8μg/ml)分别刺激该细胞,并分别作用24h、48h、72h,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测各浓度、各时间点IL-6的表达水平,确定LPS的最适刺激浓度及最佳处理时间,再以其进行后续实验;(2)用前述所测LPS刺激HIBECs细胞,并设立正常细胞对照组,Western blot检测磷酸化的STAT3(p-STAT3)蛋白和STAT3蛋白表达情况,确定pSTAT3/STAT3蛋白比例,探讨LPS能否激活IL-6/STAT3信号通路;(3)再以前述所测LPS干预HIBECs细胞,同时设立正常细胞对照组,分别采用荧光定量逆转录PCR(RT-q PCR)和Western blot测定c-Myc、Mcl-1的m RNA及蛋白表达水平,进一步探讨LPS刺激对IL-6/STAT3信号通路下游因子表达的影响;(4)用前述所测LPS刺激HIBECs细胞,同时设立正常细胞对照组及空白对照组,MTT测定细胞增殖率,探讨LPS刺激对HIBECs细胞增殖的影响。(5)运用SPSS16.0统计学软件对上述结果进行统计分析。结果(1)ELISA检测结果显示:LPS刺激能够促进HIBECs细胞分泌IL-6,并呈一定的时效、量效关系。在一定范围内随着LPS浓度的增加,IL-6的分泌逐渐增加,而且当LPS浓度为4μg/ml(F=16.492,P<0.001),刺激时间为24h时(F=17.763,P<0.01),IL-6的分泌量达最大,然后随LPS浓度的升高,刺激时间的延长逐渐下降;(2)Western blot结果显示:与正常细胞对照组相比,LPS刺激组p-STAT3/STAT3蛋白比例明显增高(t=6.022,P<0.05);(3)RT-q PCR结果显示:使用LPS处理后,HIBECs细胞c-Myc m RNA和Mcl-1 m RNA的表达明显上调,较对照组分别上升了约36倍(t=14.59,P<0.01)和2.4倍(t=19.10,P<0.01);Western blot结果显示:与正常细胞对照组相比,LPS处理组c-Myc蛋白(t=46.45,P<0.001)、Mcl-1蛋白(t=5.383,P<0.05)的表达显著增多;(4)MTT结果显示:LPS刺激能够促进HIBECs细胞增殖(t=10.66,P<0.01)。结论LPS刺激能够激活HIBECs细胞中的IL-6/STAT3信号通路,并能在m RNA和蛋白水平上提高该信号通路下游因子c-Myc和Mcl-1的表达,并且可能通过该信号通路介导HIBECs细胞的增殖。