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水稻病害严重影响水稻的产量和质量,对水稻生产造成巨大威胁。模式植物拟南芥中的研究发现,拟南芥组蛋白单泛素化E3连接酶基因AtHUBl (Arabidopsis thaliana Histone Monoubiquitinationl)参与对拟南芥花期和抗病防卫反应的调控。本研究从水稻中克隆了该基因的同源基因,命名为OsHUB1,并对其功能进行了初步分析,取得了以下实验结果：利用RT-PCR的方法克隆了水稻OsHUBl基因,该基因含有全长2655bp的开放阅读框,编码885个氨基酸残基的多肽,其C-端具有一个RING指保守结构域,该结构域与其他编码泛素E3连接酶的蛋白序列具有高度的同源性。为了阐明OsHUB1基因与水稻抗病反应的联系,我们分析了不同条件下该基因的表达情况。研究发现,水稻接种纹枯病菌(Rhizoctonia solani)后2d内OsHUBl基因表达显著增加,随后下调；接种白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv. oryzae)之后该基因的表达下调,结果表明,水稻OsHUB1基因对于纹枯病菌和白叶枯病菌的侵染都能做出应答,但作用方式可能不同。此外,研究发现水稻用水杨酸(Salicylic acid)和茉莉酸(Jasmonate acid)处理之后,OsHUB1基因均能够被诱导表达,暗示OsHUB1可能通过SA和JA介导的信号转导途径在水稻抗病反应中发挥作用。为了研究OsHUB1基因的生物学功能,我们构建了能够在植物中过量表达的重组载体pCAMBIA99-1-OsHUB1,进行了拟南芥hub1突变体的遗传转化,通过筛选,获得了转OsHUB1纯合体植株。拟南芥hub1突变体是HUB1功能缺失突变体,表现出早花和对腐生病原真菌的感病性增强。对这些转基因株系进行表型分析,结果显示转OsHUBl基因的后代的开花时间和对腐生病原真菌Alternaria brassicicola的感病性与野生型对照相比无明显差异,暗示水稻OsHUB1蛋白在调控拟南芥花期和对腐生病原真菌抗性方面具有与拟南芥HUB1相似的功能。为了进一步研究OsHUB1基因在水稻中的功能,我们构建了OsHUB1的RNAi重组载体pTCK303-OsHUB1,经过农杆菌介导的方法进行了水稻遗传转化,已经获得了32个T1代RNAi突变株系,为进一步研究OsHUB1的功能打下基础。