Pokemon对人乳腺癌MCF-7细胞增殖能力的影响

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目的:观察Pokemon对人乳腺癌细胞增殖的影响,分析其与临床病理特征的相关性。方法:实验分为两部分。第一部分以体外培养的乳腺癌细胞MCF-7为研究对象,构建表达pokemon慢病毒载体,将Pokemon表达慢病毒载体转染MCF-7细胞,建立稳定表达pokemon的MCF-7细胞系,通过MTT实验检测MCF-7细胞的增殖情况并绘制生长曲线,同时利用平板克隆形成实验探明Pokemon对乳腺癌细胞增殖的作用,再通过流式细胞术检测过表达Pokemon与MCF-7细胞细胞周期分布的关系。第二部应用组织芯片及免疫组织化学染色方法检测50例乳腺癌原位组织及相对应的淋巴结组织中Pokemon的表达差异,并分析其与临床病理的关系。结果:1)Pokemon对MCF-7乳腺癌细胞增殖的影响:①Pokemon表达降低MCF-7细胞增殖能力。②Pokemon降低MCF-7细胞克隆形成能力。③Pokemon阻滞MCF-7细胞于G1期。2)Pokemon染色阳性信号以细胞核着色为准,呈浅棕色、棕色、棕褐色颗粒。①Pokemon在乳腺癌组织中的表达主要在细胞核,其中有4例淋巴结组织标本同时伴有细胞浆内染色;50例癌原位组织中有35例Pokemon阳性表达,总阳性率为70%。配对的50例淋巴结组织样本中有34例Pokemon阳性表达,阳性率为68%。Pokemon在两组中均有较高的表达,但其间比较差异没有统计学意义(p>0.05)。②在乳腺癌原位组织中Pokemon的表达与ER、PR的表达存在相关性,随着受体表达的增加阳性表达率逐渐增高,Pokemon的表达与ER、PR的升高呈正相关,差异有统计学意义(p<0.05),且与ER的相关性较大(R=0.515)。在乳腺癌淋巴结组织中Pokemon的表达与ER的升高呈正相关,差异有统计学意义(p<0.05),但与PR的表达不具有相关性(p>0.05)。③在乳腺癌原位组织中:发病年龄:在年龄<50岁和年龄≥50岁的癌组织中,Pokemon表达阳性率分别为72.7%和67.9%,两者比较差别无统计学意义(p>0.05)。胞核分化等级:在胞核分化分别为1级、2级、3级的癌组织中,Pokemon的阳性表达率分别为83.3%、66.7%、50%,三组比较差别无统计学意义(p>0.05)。④在乳腺癌淋巴结组织中:发病年龄:在年龄<50岁和年龄≥50岁的癌组织中,Pokemon表达阳性率分别为53.6%和78.6%,两者比较差别无统计学意义(p>0.05)。胞核分化等级:在胞核分化分别为1级、2级、3级的癌组织中,Pokemon的阳性表达率分别为83.3%、72.2%、25%,三组比较差别无统计学意义(p>0.05)。结论:1)Pokemon抑制MCF-7细胞的增殖,其机制可能与Pokemon能阻滞MCF-7细胞于G1期有关。2)在乳腺癌原位组织中Pokemon的表达与ER、PR的表达存在正相关性,在乳腺癌淋巴结组织中Pokemon的表达与ER的升高呈正相关。
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