论文部分内容阅读
葡萄籽提取物(GSE)富含多酚类物质,其抗氧化功能极为显著。关于GSH的抗氧化功能,多数学者归因于其携带的能够自发淬灭自由基的还原性基团。新的研究发现,其他类似于GSE的天然抗氧剂除能直接淬灭自由基外,还能调节抗氧化酶的活力间接发挥抗氧化作用。因此,本论文将重点研究GSE是否可从调节细胞抗氧化酶基因表达与酶活力的角度发挥其抗氧化功能。本研究首先从3周龄的浏阳黑山羊臀肌中分离和培养原代肌肉细胞(PMC),并将PMC作为本实验的基本细胞模型。采用2×4因子试验设计,即两个应激状态(非氧化应激状态,不添加H202;氧化应激状态,添加100μMH202)和4个GSE添加水平(0、1、10和60μg/mL),每个处理的细胞重复数在4个以上。研究在不同应激状态下,GSE对细胞抗氧化酶基因表达和活力的影响。应用qPCR技术测定PMC中过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px1)的基因表达,同时检测CAT、SOD和GSH-Px的酶活力。结果发现:GSE提高非应激状态下PMC的总抗氧化能力(P<0.05),同时提高氧化应激状态下PMC的细胞活力以及CAT和SOD的酶活力(P<0.05),降低氧化应激状态下PMC的GSH含量(P<0.05),增加氧化应激状态或非氧化应激状态下细胞GSH-Px的酶活力(P<0.05);GSE降低非应激状态下CAT和SOD的基因表达(P<0.05),增加氧化应激状态下CAT和SOD的基因表达(P<0.05)。综上所述,GSE可通过调节细胞抗氧化酶基因表达或酶活力来增强细胞的抗氧化能力,以减少氧化应激对细胞的损害。