大鼠回肠贮袋炎的肠屏障变化研究

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目的:建立大鼠回肠贮袋炎模型,研究大鼠回肠贮袋炎的肠屏障变化,并探讨其发生改变的机制。方法:利用显微外科技术建立大鼠回肠贮袋模型,将模型大鼠随机分为IPAA组(接受回肠贮袋手术,术后正常饮水)和DSS组(接受回肠贮袋手术,术后第30天始,自由饮用5%DSS溶液4天),并设假手术组(接受开关腹手术,术后正常饮水)作为对照。实验期间观察记录各组大鼠体重变化、便血情况、粪便评分;术后第35天,处死全部大鼠,假手术组取末端回肠组织,IPAA组及DSS组取贮袋组织及贮袋近端回肠组织,HE染色进行组织学评分;免疫组化染色检测组织MPO、occludin蛋白表达水平;留取血标本,采用比色法测定血D-乳酸浓度;实时荧光定量PCR检测组织IL-1β、IL-6、TNF-α和IL-10的m RNA转录水平。结果:各组大鼠术后体重在短期下降之后逐渐增长,术后第30-35天,DSS组体重再次持续下降,假手术组和IPAA组则继续增长;DSS组大鼠均出现血便(6/6),假手术组(0/6)和IPAA组(0/6)均无便血;DSS组粪便评分低于假手术组(P<0.01)和IPAA组(P<0.01),IPAA组粪便评分低于假手术组(P<0.01);DSS组和IPAA组贮袋的组织学评分均高于DSS组回肠、IPAA组回肠和假手术组回肠(P<0.01),且DSS组贮袋高于IPAA组贮袋(P<0.01),而各组回肠的组织学评分之间差异无统计学意义(P>0.05)。DSS组和IPAA组的MPO蛋白表达水平,血D-乳酸浓度,IL-1β、IL-6和TNF-α的m RNA转录水平均高于假手术组(P<0.01),且DSS组均高于IPAA组(P<0.01)。DSS组和IPAA组的occludin蛋白表达水平和IL-10m RNA转录水平均低于假手术组(P<0.01),且DSS组均低于IPAA组(P<0.01)。结论:1.成功建立大鼠回肠贮袋模型,并使用DSS成功诱导大鼠回肠贮袋炎模型。2.大鼠回肠贮袋炎模型的肠屏障结构和功能受损,受损程度和炎症程度呈正相关。3.促炎因子相对增多和抗炎因子相对减少促进肠屏障受损。4.针对促炎因子、抗炎因子进行的治疗,可能对肠屏障结构和功能的恢复有效。
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