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本文以哈尼、丰香、北辉等10份栽培种草莓为试材,采用未受精子房离体培养的方法诱导雌核发育,以期获得栽培种草莓的单倍体植株。对基因型、培养基种类、花托接种方式等影响离体雌核发育的因素作了比较分析,并对再生植株进行了初步鉴定。此外,为了提高草莓种子在培养基上的发芽率,研究了培养方式和种子处理方式对发芽的影响。主要结果如下:
1.离体培养的草莓未受精子房的再生植株诱导率与品种有关,在供试的10个草莓栽培种中,只有哈尼和北辉诱导出了再生植株。子房膨大花托百分率以北辉最高,为19.37%,图得拉最低,仅3.70%;平均每花托结种数以早明亮最高,为8粒;而出苗率以哈尼最高,为2.95%,北辉其次,为0.79%。其它品种出苗率为零。
2.基本培养基是影响草莓未受精子房离体诱导雌核发育再生植株的主要因素之一。子房膨大花托百分率和平均每花托结种数以B5培养基最高,其次为Nistch,MS最低;但种子出苗率以MS最高,为1.63%;Nistch其次,B5培养基出苗率最小,仅0.87%。
3.不同品种的离体雌核发育的最适培养基不同。北辉适合在MS培养基培养,所获种子的出苗率较高;哈尼出苗率以Nistch培养基最高,达3.45%,B5培养基其次,MS最低,仅1.41%。
4.接种方式对草莓未受精子房离体诱导有一定的影响。花托切开培养,子房膨大花托百分率高于整个花托培养,但整个花托培养的平均结种数和出苗率高于花托切开培养。
5.2004年和2005年两年共获得了26个生长正常的草莓胚囊再生株系。哈尼离体再生植株的倍性水平较复杂,初步鉴定结果表明单倍体(2n=28)株系占所鉴定株系的26.32%,八倍体(2n=56)株系占21.05%,其它株系可能为非单倍体植株。
6.草莓种子处理方式对发芽率、发芽速度及发芽整齐性有很大影响。种子整粒培养的发芽率普遍低于切开培养的,切开处理的种子平均发芽率为93.01%,而整粒培养的发芽率平均为13.12%。且种子切开培养发芽较快,出苗较整齐。
7.草莓种子离体培养发芽率、发芽速度及发芽整齐性受培养方式的影响,且在基因型间有差异。丰香和EMC种子以蒸馏水培养发芽率最高,分别为96.67%和100%。其它试材均在1/2MS+0.2mg/L6-BA+0.1mg/LGA+0.02mg/LIBA+3%蔗糖+0.6%琼脂培养基上培养发芽最高,达95%~100%。
8.不同试材草莓种子发芽率、发芽快慢不同,二倍体野生草莓EMC较易发芽,八倍体栽培种发芽较为困难,栽培品种间的发芽率和发芽速度差异不大。