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第一部分高脂饮食对大鼠下丘脑Sfrp5及Wnt配体表达的影响目的:探讨高脂饮食对大鼠下丘脑Sfrp5及Wnt配体表达的影响。方法:将SD雄性大鼠以普食和高脂饲料喂养16周后分别分为普食组(Normal chow diet,NCD)和高脂组(High fat diet,HFD)。采用Real-time PCR分别检测2组大鼠下丘脑Wnt5a、TNFα的表达情况;采用Western blot方法分别检测2组大鼠下丘脑Sfrp5、JNK、p-JNK的表达情况。结果:高脂大鼠下丘脑Wnt5a的mRNA较普食组明显升高(p<0.05)。TNFα的mRNA含量较普食大鼠下丘脑显著升高(p<0.01);同时高脂大鼠下丘脑Wnt5a蛋白含量、p-JNK/JNK蛋白含量比值较普食组明显升高(p<0.01,p<0.05)。而高脂大鼠下丘脑Sfrp5蛋白含量较普食组明显降低(p<0.01)。结论:高脂饮食可以导致下丘脑炎症,同时引起下丘脑Sfrp5表达下降。第二部分中枢输注Sfrp5通过抑制JNK通路降低高脂诱导下丘脑炎症大鼠肝脏VLDL-TG的分泌目的:探讨中枢输注Sfrp5对高脂饮食诱导下丘脑炎症大鼠肝脏VLDL-TG分泌的影响。方法:选取普食和高脂喂养16周的SD大鼠,构建大鼠第三脑室微量给药系统,根据脑室输注液体不同将大鼠分为普食+人工脑脊液组(ICV a CSF)+NCD,普食+Sfrp5组(ICV Sfrp5)+NCD;高脂+人工脑脊液组(ICV a CSF)+HFD,高脂+Sfrp5组(ICV Sfrp5)+HFD,同时给予高脂大鼠外周输注Sfrp5,分为高脂+生理盐水静脉输注组(HFD+Saline,iv),高脂+Sfrp5静脉输注组(HFD+Sfrp5,iv)。静脉注射Tyloxapol抑制血浆脂蛋白水解酶,采用生化方法检测血浆甘油三酯(TG)、游离脂肪酸(FFA)含量并评估血浆VLDL-TG的变化,同时运用Western blot检测各组下丘脑JNK,p-JNK蛋白表达的变化。结果:与(ICV a CSF)+HFD相比,(ICV Sfrp5)+HFD组能明显降低血浆TG水平,同时抑制VLDL-TG的分泌,差异有统计学意义(p<0.01),但各组血浆FFA水平无变化(p>0.05);与(ICV a CSF)+NCD组相比,(ICV Sfrp5)+NCD组血浆TG、FFA水平、VLDL-TG分泌率变化均无统计学差异(p>0.05);同时(HFD+Sfrp5,iv)组血浆FFA、TG含量、VLDL-TG分泌率较(HFD+a CSF,iv)相比均无统计学差异(p>0.05)。除此之外,与(ICV a CSF)+NCD相比,(ICV Sfrp5)+NCD下丘脑内p-JNK/JNK含量无统计学意义。而(ICV Sfrp5)+HFD组下丘脑p-JNK/JNK含量明显低于(ICV a CSF)+HFD组(p<0.01)。结论:中枢输注Sfrp5通过抑高脂大鼠下丘脑JNK通路降低肝脏VLDL-TG的分泌。第三部分中枢输注Sfrp5依赖下丘脑ATP敏感性钾通道降低高脂诱导下丘脑炎症大鼠肝脏VLDL-TG的分泌目的:探讨下丘脑ATP敏感性钾通道在Sfrp5降低高脂大鼠肝脏VLDL-TG分泌过程中的作用。方法:选取高脂和普食喂养16周的SD大鼠,构建大鼠第三脑室微量给药系统,根据脑室输注液体不同将高脂大鼠分为:第三脑室输注人工脑脊液组:(ICV a CSF)+HFD组,第三脑室输注Glibenclamide组:(ICV Glibenclamide)+HFD组,第三脑室输注Sfrp5组,(ICV sfrp5)+HFD组,第三脑室输注Sfrp5和Glibenclamide组:ICV(sfrp5+Glibenclamide)+HFD组,以及第三脑室输注Diazoxide组:(ICV Diazoxide)+HFD组。同时将普食大鼠分为:第三脑室输注人工脑脊液组:(ICV a CSF)+NCD组,第三脑室输注Sfrp5组:(ICV Sfrp5)+NCD组,第三脑室输注Diazoxide组:(ICV Diazoxide)+NCD。静脉注射Tyloxapol抑制血浆脂蛋白水解酶,采用生化方法检测血浆TG含量并评估血浆VLDL-TG分泌率的变化。结果:与第三脑室输注人工脑脊液组即:(ICV a CSF)+HFD相比,第三脑室输注Sfrp5组即:(ICV sfrp5)+HFD组可以明显降低血浆TG含量及VLDL-TG的分泌(p<0.01),而当Sfrp5联合Glibenclamide时,该作用被抑制。但单独输注Glibenclamide无法降低血浆TG含量和VLDL-TG的分泌。同时,与(ICV a CSF)+HFD组相比,高脂大鼠输注Diazoxide组,即(ICV Diazoxide)+HFD组明显降低血浆TG水平和VLDL-TG分泌率(p<0.01);与普食对照组即(ICV a CSF)+NCD相比,(ICV Diazoxide)+NCD同样可以有效降低TG含量及VLDL-TG分泌率(p<0.01)。结论:中枢输注Sfrp5依赖下丘脑ATP敏感性钾通道降低高脂大鼠肝脏VLDL-TG的分泌。第四部分中枢输注Sfrp5依赖“脑-肝轴“降低高脂诱导下丘脑炎症大鼠肝脏VLDL-TG的分泌目的:探讨中枢输注Sfrp5降低高脂大鼠肝脏VLDL-TG的分泌是否依赖“脑-肝轴”。方法:选取高脂喂养16周的SD大鼠,构建大鼠第三脑室微量给药系统,第四脑室孤束核微量注射系统,肝迷走神经离断模型。实验中分为第三脑室输注人工脑脊液+迷走神经复合体输注生理盐水组:ICV(a CSF)+DVC(Saline),第三脑室输注人工脑脊液+迷走神经复合体输注MK801组:ICV(a CSF)+DVC(MK801)组,第三脑室输注Sfrp5+迷走神经复合体输注生理盐水组:ICV(Sfrp5)+DVC(Saline),第三脑室输注Sfrp5+迷走神经复合体输注MK801组:ICV(Sfrp5)+DVC(MK801)组;肝迷走神经离断假手术+第三脑室输注人工脑脊液组:Sham Vx+ICV(a CSF),肝迷走神经离断术+第三脑室输注人工脑脊液组:Hep Vx+ICV(a CSF),肝迷走神经离断假手术+第三脑室输注Sfrp5组:Sham Vx+ICV(Sfrp5),肝迷走神经离断术+第三脑室输注Sfrp5组:Hep Vx+ICV(Sfrp5),静脉注射Tyloxapol抑制血浆脂蛋白水解酶,采用生化方法检测血浆甘油三酯含量并评估血浆VLDL-TG的变化。结果:DVC输注MK801可以阻断中枢输注Sfrp5对高脂大鼠肝脏VLDL-TG分泌率的作用,但单独向DVC输注MK801无此作用。除此之外,肝脏迷走神经离断后,中枢输注Sfrp5降低高脂大鼠肝脏VLDL-TG的作用被抑制。结论:中枢输注Sfrp5依赖“脑-肝轴“降低高脂诱导下丘脑炎症大鼠肝脏VLDL-TG的分泌。第五部分中枢输注Sfrp5降低高脂大鼠VLDL-TG的分泌率依赖肝脏SCD1的作用目的:探讨中枢输注Sfrp5降低高脂大鼠肝脏VLDL-TG的分泌的肝内机制。方法:采用Western blot检测第三脑室输注人工脑脊液组:ICV a CSF组,第三脑室输注Glibenclamide组:ICV Glibenclamide组,第三脑室输注Sfrp5组:(ICV sfrp5)组以及第三脑室输注Sfrp5和Glibenclamide组:ICV(Sfrp5+Glibenclamide)组中肝FAS,DGAT1,DGAT2,SCD1,MTP的蛋白表达。同时检测其余各高脂大鼠组SCD1蛋白含量变化。结果:(ICVSfrp5)组肝脏中SCD1水平明显低于其他组(p<0.01),而FAS,DGAT1,DGAT2,MTP蛋白含量无明显变化。同时余各组肝脏SCD1蛋白含量均低于其对照组(p<0.01)。结论:中枢输注Sfrp5通过抑制肝脏SCD1的活性而降低高脂大鼠VLDL-TG的分泌。