目的:HCV感染早期,中和抗体的快速诱导与病毒控制和自发清除密切相关。滤泡辅助性T（Tfh）细胞可通过辅助B细胞分化,产生长效高亲和力中和抗体。而HCV感染过程中,循环Tfh细胞（c Tfh）在中和抗体应答中的作用尚未明确,本研究旨在探讨HCV感染患者中c Tfh细胞分化与中和抗体免疫应答的关系,为HCV疫苗设计提供新策略。方法:（1）收集2016年12月至2018年9月期间郴州市静脉吸毒史人群血样,剔除HBs Ag、HIV、HDV及梅毒等感染性疾病患者样本。根据HCV RNA、HCV-Ig G结果将纳入病例分为健康对照组（Healthy control,HC）（n=28）、丙型肝炎病毒感染组（HCV infection）（n=43）,所有纳入患者跟踪随访至少6个月;（2）流式细胞术检测健康对照以及HCV感染患者中c Tfh细胞及其亚群的表型差异、胞内细胞因子IL-21、IFN-γ、IL-10水平、核内转录因子Bcl-6、T-bet的表达情况;（3）荧光素酶报告基因系统检测中和抗体强度和广谱性,并分析c Tfh细胞及其亚群与HCV中和抗体的相关性;（4）实时荧光定量PCR检测HCV病毒RNA载量,PCR扩增HCVCore-E1及NS5B序列并通过基因测序确定HCV基因型别,并分析HCV RNA与中和抗体及c Tfh细胞及其亚群的相关性;（5）体外共培养检测c Tfh细胞及其亚群辅助B细胞分化、抗体的产生。结果:（1）与健康对照组相比,HCV感染患者c Tfh细胞频数明显增加（P=0.024）,且CXCR3+c Tfh细胞频数明显增加（P=0.001）,CXCR3+c Tfh/CXCR3-c Tfh细胞的比值也显著增加（P=0.001）;（2）CXCR3+c Tfh细胞与HCV中和抗体强度、广度及HCV各个型别滴度呈正相关,CXCR3+c Tfh/CXCR3–c Tfh细胞比值也与中和抗体强度呈正相关（R=0.317,P=0.038）,而CXCR3-c Tfh细胞与HCV中和抗体无相关性;（3）HCV RNA与HCV中和抗体无相关性,且与c Tfh细胞及其亚群无相关性;（4）与CXCR3-c Tfh细胞相比,CXCR3+c Tfh细胞表面分子CD40L、PD-1、Ki-67、HLA-DR、ICOS以及CD127高表达（P<0.001）;功能上CXCR3+c Tfh细胞胞内细胞因子IL-21、IFN-γ、IL-10高分泌（P<0.001）;转录水平上CXCR3+c Tfh细胞Bcl-6、T-bet高表达（P<0.001）;（5）体外CXCR3+/-c Tfh细胞与B细胞共培养实验发现:与CXCR3-c Tfh细胞相比,CXCR3+c Tfh细胞产生Ig A、Ig G、Ig M水平相当,但CXCR3+c Tfh细胞能有效促进HCV E2c特异性B细胞增殖。结论:HCV感染期间,循环CXCR3+Tfh细胞可能通过辅助B细胞分化从而参与中和抗体应答。靶向诱导循环CXCR3+Tfh细胞可能有效促进中和抗体应答、病毒清除和控制。此研究将为疫苗优化提供参考。