【摘 要】
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该实验采用RT-PCR方法从人肝组织总RNA中扩增出hIL-18成熟肽编码区cDNA片段;将hIL-18cDNA与载体PKK223-3重组,在大肠杆菌JM105中进行表达;动力学分析表百在30℃、2mmol/LIPTG
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该实验采用RT-PCR方法从人肝组织总RNA中扩增出hIL-18成熟肽编码区cDNA片段;将hIL-18cDNA与载体PKK223-3重组,在大肠杆菌JM105中进行表达;动力学分析表百在30℃、2mmol/LIPTG诱导6h表达产量最高;rhIL-18以包含体形式存在于原核细胞的胞浆中;WesternBlot证明表达的rhIL-18具有IL-18样的抗原性;经包含体提取、洗涤、变性、复性处理,复性后的rhIL-18经DEAE-SepharoseCL-6B阴离子交换柱一步纯化,所得目的蛋白的纯度为94﹪;利用PBMC,通过T细胞增殖实验、NK细胞的细胞毒实验及细胞因子诱导合成实验,证实了所得到的rhIL-18基本上具有天然IL-18相同的生物学活性.
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