榅桲的组织培养快繁及耐盐性研究

来源 :新疆农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:a1402070128
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本研究以新疆苹果型榅桲为试材,研究了榅桲的茎段及子叶组织培养快繁途径,分别采用榅桲组培苗和种子对其耐盐性作了初步探讨。组培快繁试验中分别研究了不同灭菌剂、灭菌时间、培养基、激素组合等对榅桲外植体灭菌、初代培养、继代培养和生根培养的影响。耐盐性研究中,探讨了不同盐种类、不同盐浓度及不同盐胁迫时间对榅桲组培苗生长性状、生理指标的影响。同时也研究了上述盐胁迫因素对榅桲种子萌发情况、酶活性和离子分布的影响。分析结果表明:1)用榅桲茎段进行组培快繁研究中,0.1%升汞溶液消毒5min,灭菌效果最好;初代培养基以MS+6-BA 0.6mg/L效果较好,萌芽率和增殖倍数均较高,分别为93.3%和4.7;继代培养基以MS+6-BA0.6 mg/L+IBA0.2mg/L和MS+6-BA0.6mg/L+IBA0.4mg/L组合交替使用更有利于组培苗的增殖和壮苗;生根培养基以1/2MS(I)+NAA1.0mg/L生根率最高,达50%,平均根数为7-10根。短时间(7d)暗培养对诱导榅桲苗生根有利,随着暗培养天数的增加叶焦边现象逐渐加重,甚至出现顶端枯死现象;6-BA对诱导榅桲组培苗生根无益且易出现畸形叶。2)在榅桲成熟胚子叶不定植株再生研究中,1/4MS(I)+6-BA5mg/L+NAA0.5mg/L组合诱导成熟胚子叶芽分化效果最好,芽分化率可达77.5%;继代培养基以MS+6-BA 0.6mg/L+IBA0.2mg/L效果较好,增殖倍数约达4倍;生根培养基以速蘸IBA50mg/L 3S后接入活性炭培养基中生根率最高为75%,根数较多,但根生长缓慢,30d平均根长还不到1cm。移栽炼苗采用培养室培养钵炼苗法,以锯末为介质,15d左右长出新根,30d后成活率为78%。3)组培苗耐盐性研究中,萌芽率、增殖倍数、平均株高均随着盐浓度的增大而降低,膜透性和盐害率随着盐浓度的增大而升高。三种保护酶SOD、CAT、POD活性除POD活性随着Na2SO4浓度的增加降低外,其它均随着盐浓度的增大呈先上升后下降趋势。NaCl胁迫下叶绿素a、b和总叶绿素含量的变化趋势相同,均呈下降-升高-下降趋势,但始终在空白处理时最高,最大盐浓度时最低。Na2SO4胁迫下叶绿素a和总叶绿素含量的变化趋势相同,呈下降趋势,叶绿素b与之不同,呈先升高后下降趋势。类胡萝卜素的含量变化没有规律性。认为,萌芽率、增殖倍数、平均株高、膜透性、盐害率、SOD、CAT、POD活性均可作为鉴定榅桲耐盐性评价指标,叶绿素可作为抗盐评价的参考指标。两种盐胁迫下,榅桲组培苗更能耐受NaCl胁迫,NaCl和Na2SO4分别在浓度为0.6%和0.8%时开始对榅桲组培苗造成严重伤害,在0.8%和1.0%时至死率超过50%。4)榅桲种子耐盐性研究中,随着盐浓度的增大,发芽率和成苗率均呈下降趋势。NaCl胁迫时,SOD、CAT活性均随着盐浓度的增大呈先上升后下降趋势,POD活性呈上升趋势。Na2SO4胁迫时,随着盐浓度的增大POD、CAT活性呈先上升后下降趋势,SOD活性呈降低趋势。所以认为,不同种类盐胁迫下,榅桲种子的耐盐机制不同。随着盐浓度的增大,芽苗和培养基中的Na+均呈上升趋势,种皮中的Na+呈先下降后上升趋势。K+在各组织中的变化没有规律性。NaCl胁迫下,随着盐浓度的增加,芽苗和种皮中Na+/K+呈升高-降低趋势,但始终高于空白处理中Na+/K+的值,培养基中Na+/K+呈升高-降低-升高趋势。Na2SO4胁迫时芽苗和种皮中Na+/K+呈升高-降低-升高趋势,培养基中Na+/K+呈升高趋势。综合分析,发芽率、成苗率、SOD、CAT、POD、榅桲芽苗中Na+含量可作为榅桲种子耐盐性评价指标。K+、Na+/K+变化较复杂,能否作为榅桲种子耐盐性鉴定的指标还有待于研究。Na2SO4胁迫对榅桲种子发芽的影响比NaCl胁迫大。以盐胁迫浓度对榅桲种子发芽率和成苗率为标准来看,Na2SO4和NaCl浓度分别为100mmol和150mmol时严重影响榅桲种子发芽。
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