多种刺激或损伤作用于成年哺乳动物中枢神经系统（central nervoussystem），导致一系列复杂的细胞和分子事件，这些事件表明机体试图修复脑或脊髓的损伤区域。早在1928年，Cajal就注意到，损伤后的周围神经系统能够成功愈合，而成年CNS由于损伤的轴突不能再生，导致持续的功能障碍。反应性胶质化（reactive gliosis）是这些事件的基本病理表现，以胶质细胞胞核、胞体和突起肿胀，胶质细胞增生甚至肥大为特征。反应性胶质化的过程是胶质细胞维持神经元微环境稳定的过程，增殖的星形胶质细胞（astrocyte，Ast）参与损伤部位的髓磷脂和神经元碎屑的清除，包绕损伤区域，控制细胞外间隙的各种离子、神经递质、营养因子、代谢产物的含量等。因而，它对于损伤修复是必要的，但持续的胶质反应将导致损伤部位致密的胶质瘢痕形成。长期以来，胶质瘢痕被认为阻碍了轴突再生。迄今，有关胶质化及胶质瘢痕的机理仍不清楚。星形胶质细胞是反应性胶质化涉及的最主要细胞。成年CNS的不同部位损伤发现，损伤后的一定时间和范围内，反应性星形胶质细胞不仅增强表达中间丝胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein，GFAP），而且另一种只主要表达于发育期的中间丝波形蛋白（vimentin，Vim）重新表达。提示Vim在胶质瘢痕的形成中可能有重要作用，两种中间丝之间可能存在一定的联系。以往的研究多集中于GFAP，对Vim较少关注，更缺乏系统深入的研究。我们利用成年大鼠脑刺伤模型，较全面描述了Vim的表达。在此基础上，研究了Ast可分泌的睫状神经营养因子（ciliary neurotrophic factor，CNTF）对反应性胶质化的影响；再利用重组Vim反义和正义逆转录病毒，通过离体和在体研究，进一步阐明Vim在胶质瘀痕形成中的作用及其与GFAP表达的关系。研究结果如下： 1．脑刺伤后的Vi。表达 脑刺伤后的RTF＊R显示紧邻伤道的wm RNRNA增加显著：皮质分子层、胁脏体、海马的伤道周围出现Vim兔疫反应阳性细胞，细胞胞浆和突起均着色，阳性细胞主要出现在伤道附近。同时，GFAP染色的反应性胶质细胞除在相应的Vim染色部位外，还在离伤道较远的距离出现，较正常的 Ast数量明显增多，且胞体增大，突起增多、延长，染色加深。lw时 Vim上述变化进一步加强，开始形成胶质癫痕，4W即见伤道周围形成致密的大量突起相互交织成致密的胶质癫痕；流式细胞仪细胞记数显示 Vin卜）细胞显著增加。 2．CNTF对胶质派痕的作用 在体研究发现，重组CNTF能够显著增加反应性胶质化时的GFAP表达，呈量效关系，并影响到远离损伤部位的对侧GFAP表达。离体研究发现，CNTF增强Ast的Vim和GFAP表达，但可能不是通过细胞内游离钙离子qCaZq川的升高起作用。 3．V i m逆转录病毒对川川 3T3细胞和神经干细胞的影响 3．IVha反义重组逆转录病毒pLXSN尼sNim使正常表达Vim的NIH3T3细胞胞体失去典型的极形，突起回缩变短；与此变化相反，Vim正义逆转录病毒 pLXSN沾Nim使 NIH3 T3细胞突起长，容易与相邻突起形成网络。 3．2经Vim反义逆转录病毒感染，表达Vim的神经干细胞集落分化的胶质细胞突胞体小、起较短，生长缓慢：而v豆m正义逆转录病毒感染神经干细胞后，分化的胶质细胞胞体大，突起较长，生长迅速。 4．Vim逆转录病毒对反应性胶质化和胶质疵痕的作用 4＊离体实验 4。1．IVim反义逆转录病毒感染划伤的 Ast后，见 Ast的胞体缩小，突 Vlll起短，细胞生长增殖显著抑制；Vim和GFAP荧光兔疫细胞化学染色均变浅，相对荧光强度降低；原位杂交见 Vim mRNA表达水平明显下降。 4．1．2 Vin正义逆转录病毒感染划伤Ast后，见Ast的胞体大，突起长，细胞生长增殖无抑制；Vim和GFAP荧光兔疫细胞化学染色强，相对荧光强度升高；原位杂交见 Vim mRNA表达水平增强。 4．2在体实验 4．2二伤道内给予Vim反义逆转录病毒后，伤道经过的大脑皮质、姘脏体、海马、丘脑等部位均见Vim阳性细胞出现的部位缩小、阳性细胞数目减少、阳性细胞的胞体缩小、突起较短小；同组的GFAP阳性细胞亦呈相应改变；在4W时，胶质癫痕形成的范围明显较小。 4．2．2给予Vim正义逆转录病毒后的Vin和GFAP阳性细胞变化与给予Vim反义逆转录病毒组呈相反变化，表现为阳性细胞范围明显扩大、阳性细胞数目增加、细胞胞体增大、突起增粗延长、胶质癫痕显著增强。 综上结果表明，在成年大鼠脑损伤后Vim在核酸一RNA、兔疫组织化学一蛋白、流式细胞仪记数一细胞水平均增加，伴随胶质化及胶质疲痕形成的全过程。反应性胶质细胞能够分泌的CNTF促进胶质瘀痕的形成。给予反义Vim逆转录病毒不仅大大减轻了胶质瘀痕中的Vin表达，还在一定程度上阻碍了GFAP的表达，提示Vim在胶质癫痕形成中的重要作用，运用重组反义Vim逆转录病毒，有望影响胶质癫痕的程度或过程，从而改善神经元