前言 化疗是膀胱肿瘤综合治疗手段之一。目前公认丝裂霉素C(MMC)是膀胱灌注化疗最为常用，且效果较好的化疗药物之一。用传统的大剂量(1.000mg/ml)MMC膀胱灌注化疗，在杀伤肿瘤细胞的同时，往往对正常组织也造成损伤，使局部免疫力降低，并可引起骨髓抑制、化学性膀胱炎和尿道狭窄等毒副作用。如何在疗效和毒副作用间寻找平衡点，既能最大限度地杀伤肿瘤细胞，又能将毒副作用减少到最低程度是膀胱肿瘤灌注化疗上的难题。我们已往的研究表明低剂量MMC可诱导膀胱癌细胞凋亡，其抑癌效应是通过启动凋亡机制起作用的。在这一复杂的机制中，作为死亡受体与配体的Fas/Fas以及作为“死亡蛋白酶”的Caspase-3可能起重要作用。 Fas、FasL和Caspase-3是凋亡相关基因。Fas是一种Ⅰ型跨膜糖蛋白，是凋亡信号受体。FasL是一种Ⅱ型糖蛋白，是Fas的天然配体，与Fas建立了Fas/FasL细胞凋亡信号传导系统，当FasL与细胞表面的Fas以三聚体的形式结合，可激活凋亡相关基因产物向细胞内传导死亡信号，导致表达Fas的细胞凋亡。Caspase-3是Caspase家族中最重要的成员，在以Fas/FasL为代表的死亡受体介导和(或)化疗诱导的细胞凋亡中起核心作用。近年研究表明，来自体外和体内的引起凋亡的因素，如化疗药物、Fas、TN-FR1等均需先活化启动性Caspase，如Caspase-8等，再活化Caspase-3，最终导致细胞凋亡。提示了Fas/FasL的相互作用是化疗诱导凋亡的重要途径之一，而Caspase-3则在化疗诱导凋亡中起关键作用。化疗诱导肿瘤细胞凋亡的机制大致分为三个阶段:1、损伤的产生;2、损伤信号的传导;3、易感细胞对损伤信号产生应答反应发生凋亡。 本实验应用细胞培养、细胞增殖动力学、细胞形态学、免疫组织化学、TUNEL染色、FcM及wsetem blot分析等技术，从凋亡发生、信号传导和调控角度，探讨了低剂量MMC诱导膀胧癌细胞凋亡和抑制增殖的内在机制、特征及临床意义。我们的研究结果表明: 在低剂量MMC诱导膀肤癌细胞凋亡作用机制的体外实验中: 1.诱导细胞凋亡是低剂量MMC抑制膀胧癌EJ细胞生长的主要机制，其机制大致分为三个阶段:(l)DNA损伤;(2)损伤信号的传导;(3)敏感的癌细胞对损伤信号产生反应发生凋亡。 2.Fas、FasL、caspase一3凋亡相关基因参与了低剂量MMC诱导和(或)Fas/FasL介导的细胞凋亡及调控。在Caspase一3对低剂量MMC诱导人膀眯癌细胞凋亡作用的体外实验 3.本研究结果验证了对抗CasPase一3可抑制低剂量MMC诱导膀胧癌细胞凋亡。4.CasPase一3在低剂量MMC诱导膀胧癌细胞凋亡中具有重要作用。5.本研究结果为制定肿瘤治疗策略提供了新思路。 在低剂量MMC作用的膀肤癌组织中Fas、FasL、Caspase一3表达及意义的体内实验中: 6，低剂量MMc(0.smg/以)能在体内诱导敏感的膀胧癌细胞凋亡，其结果与体外实验结果相同。 7.凋亡相关基因Fas、FasL、CasPase一3参与了低剂量MMC在体内诱导和(或)Fas介导的膀胧癌细胞凋亡及调控。 8 .Fas、casPase一3随膀胧癌分期、分级的增加，表达强度下降或缺失，际L随膀胧癌分期、分级的增加淤表达蝇度朋显增高，这可能成为浸润性膀胧癌对MMC膀胧灌注化疗耐药的原因之一。 9.低剂量MMC能有效预防表浅性膀胧癌术后复发，且副作用小，用于膀胧灌化疗更为合理。