抗甜菜褐斑病的体细胞无性系变异和遗传转化的研究

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该文利用体细胞无性系变异和突变体筛选、植物转基因技术,对栽培甜菜(Beta uvlgaris L.)进行生物工程育种,创造种质资源,为甜菜品种培育提供新方法,开辟新途径.该研究采取的主要方法为:体细胞无性系变异及突变体筛选是利用在组织培养过程中存在着广泛变异的现象,对突变体进行定向筛选.遗传转化利用Ti质粒介导的二元载体法将几丁质酶基因导入甜菜单倍体材料,对转化植株进行PCR分析.在试验中, 对甜菜褐斑病原菌毒素粗提液的合适使用量进行了探索.在以Ti质粒介导的转几丁质酶基因的研究中,探索了甜菜作为转化受体的合适外植体;比较了转化时间、质粒浓度及转化方式对转化率的影响.该试验成功地通过甜菜的体细胞无性系变异,经突变体筛选得到了抗甜菜褐斑病的体细胞无性系变异株系,经多种抗病性测试,抗病性较对照了有很在的提高.田间试验中,对照感病1.29级,,而筛先烈到的株系仅为0.5级,且该株的含糖率和产糖量较对照分别提高1.1度和10.7﹪.在甜菜的遗传转化中,确定了以Ti质粒为载体的转化程序及检测手段,经PCR分析、Southern blot鉴定,确定已经得到了甜菜转基因再生植株.为植物生物技术在甜菜的遗传改良上的应用奠定了基础.
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