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胃癌是我国最常见的恶性肿瘤之一，虽然近年其发病率有下降，但恶性肿瘤的死亡人数中胃癌仍占首位。引起胃癌病人死亡的主要原因是肿瘤的复发和转移。尽管在临床上原发灶转移一直是影响肿瘤疗效的主要因素，但导致大部分胃癌患者死亡的原因并不是原发灶本身，而是肿瘤产生的侵袭、转移和复发。因此，需要有效的预后指标来确认那些有转移和复发的高危患者，并对他们进行有效的个性化治疗，以提高生存期和生存率。恶性肿瘤的发生、发展和转移是一个多因素、多阶段、涉及多基因参与调控的病理过程，参与这一过程的基因或分子，包括生长因子及其受体、细胞周期调节素、端粒酶、细胞粘附分子、基质降解酶等。从基因水平上研究肿瘤进展的分子机制，获取肿瘤细胞生长各期相关基因及对这些基因的mRNA和蛋白表达水平的检测，可为肿瘤的分子病理诊断、临床预后判断及治疗方案的选择提供理论依据，因而成为当前深入研究和关注的热点之一。在胃癌浸润、转移相关研究中，已陆续发现诸多如EGFR、bFGF、E-CD和MDR1等基因参与其发展、演进过程，任何一个基因的mRNA及其蛋白表达都是与其他基因共同表达的。本实验对MMP—2和TIMP-2在胃癌中的表达及与胃癌各临床病理指标的关系进行了研究。基质金属蛋白酶（MMPs）是一类含有Zn2+的内源性蛋白水解酶，按作用底物不同主要分为5类：（1）、胶原酶；包括间质胶原酶（MMP-1）、中性粒细胞胶原酶（MMP-8）和3型胶原酶（MMP-3）等，主要降解多种类型间质胶原和蛋白多糖的核心蛋白。（2）、明胶酶（Ⅳ型胶原酶），包括明胶酶A和明胶酶B，降解明胶和Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅹ型基底膜胶原；（3）、基质降解素（间质溶素），分为1，2，3型，；（4）、膜型基质金属蛋白酶（MT-MMP），除能降解细胞外基质（ECM）外，也能活化其他MMPs，主要为MMP-2；（5）、其他酶类（MMP-12，18，19），作用不详。TIMPs是一组低分子量的糖蛋白，可由成纤维细胞、上皮细胞、内皮细胞等产生，是组织中MMPs主要的内源性抑制因子，能特异地抑制MMPs。MMP-2为基质金属蛋白酶-2，TIMP-2为基质金属蛋白酶组织抑制因子，它能和MMP-2以共价键的方式形成复合物，抑制肿瘤细胞的浸润和转移，TIMP-2多随MMP-2的表达而表达。研究发现在不同肿瘤中它们的表达改变不尽相同，可能在不同肿瘤中它们发挥不同的作用，组织芯片（Tissue Chip，TC），又称组织微阵列（TissueMicroarray，TMA），是一种以形态学为基础的分子生物学新技术。其为医学分子生物学提供了一种高通量、大样本以及快速的分子水平的分析工具。它可被应用于各种检测基因和蛋白在组织细胞中的定位情况的原位组织技术实验，包括组织化学、免疫组织化学、免疫荧光以及原位杂交等。本实验收集210例手术切除胃癌标本，其中94例来源于绍兴市第一人民医院1995～2000间的手术切除胃癌标本，116例来源于浙江大学医学院附属第一医院2001年间手术切除胃癌标本，并随机选取同期25例慢性胃炎或胃溃疡标本作为对照。实验内容主要包括复习病历和切片，由有经验的医生核实临床病理诊断，选取样点做成组织芯片，分别采用原位杂交及免疫组织化学技术检测MMP-2和TIMP-2的mRNA及蛋白的表达情况，最后结合实验结果、临床病理资料及随访资料进行综合分析。统计学采用SPSS 15.0软件包，包括X2检验、Spearman等级相关分析、Kaplan-Meier生存曲线分析等。P值以0.05作为显著性检验标准。原位杂交的结果表明，在210例胃癌和25例非肿瘤胃粘膜组织中，MMP-2和TIMP-2的mRNA的阳性表达率分别依次为65.2％（137／210）和35％（9／25）、26.2％（55／210）和80％（20／25）。MMP-2mRNA的表达与肿瘤大小（r=0.150 P=0.025）、浸润深度（r=0.391 P=0.000）、TNM分期（r=0.215 P=0.001）、淋巴结转移（r=0.207 P=0.002）、脉管侵犯（r=0.192 P=0.004）和远处转移（r=0.153 P=0.022）呈显著正相关，P值均小于0.05。TIMP-2mRNA的表达与肿瘤大小（r=-0.171 P=0.011）、浸润深度（r=-0.194 P=0.004）、TNM分期（r=-0.131 P=0.051）、淋巴结转移（r=-0.150 P=0.025）、脉管侵犯（r=-0.268 P=0.000）和远处转移（r=-0.197 P=0.003）呈显著负相关，P值均小于0.05。MMP-2mRNA阴性表达的病例的平均生存时间和5年生存率均明显高于阳性表达的病例（P＜0.01），MMP-2阴性表达病例的预后较好；TIMP-2阳性表达病例的平均生存时间和5年生存率均明显高于阴性表达的病例，TIMP-2阳性表达病例的预后较好。免疫组织化学的结果表明，210例胃癌和25例非肿瘤胃粘膜组织中，MMP-2和TIMP-2蛋白的阳性表达率分别为70.5％（148／210）和40％（10／25）、32.4％（68／210）和85％（21／25）。MMP-2蛋白的表达与肿瘤大小（r=0.335 P=0.000）、TNM分期（r=0.176 P=0.009）、淋巴结转移（r=0.169 P=0.012）、浸润深度（r=0.201 P=0.003）、脉管侵犯（r=0.300P=0.000）和远处转移（r=0.167 P=0.013）呈显著正相关，P值均小于0.05。TIMP-2蛋白的表达与肿瘤大小（r=-0.335 P=0.000）、TNM分期（r=-0.225 P=0.000）、淋巴结转移（r=-0.166 P=0.013）、浸润深度（r=-0.355P=0.000）、脉管侵犯（r=-0.205 P=0.002）和远处转移（r=-0.228 P=0.001）呈显著负相关。P值均小于0.05。MMP-2阴性表达病例的平均生存时间和5年生存率均明显高于阳性表达的病例，MMP-2阴性表达病例的预后较好。TIMP-2阳性表达病例的平均生存时间和5年生存率均明显高于阴性表达的病例，TIMP-2阳性表达病例的预后较好。从我们的实验可以得出如下结论：MMP-2能促进胃癌的生长、侵袭和转移，TIMP-2对肿瘤的生长、侵袭、复发和转移过程中起抑制作用。两者在胃癌中的表达具有一定的相关性，是预测胃癌复发、转移及预后的重要生物学指标，并可作为对胃癌进行基因治疗的靶点加以进一步研究。