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目的:翼首草是藏医习用药材，以往药理学研究集中在其抗炎抗风湿方面，本课题组前期实验结果表明翼首草总皂苷具有抑制肿瘤细胞增殖作用。为进一步探讨翼首草的抗肿瘤作用，选取翼首草活性较强的正丁醇部位提取物(YSC-ZDC)为研究对象，考察该提取物对多种肿瘤细胞生长的抑制作用和诱导人肝癌细胞Hep3B凋亡的影响，以及抑制Hep3B侵袭转移的影响。基于Akt/PI3K信号通路探讨YSC-ZDC诱导Hep3B细胞凋亡的作用机制，基于上皮-间质转化(EMT)探讨YSC-ZDC抑制Hep3B细胞侵袭转移的作用机制;体内实验方面考察该药在裸鼠Hep3B移植瘤模型中抗肿瘤作用和在小鼠体内的急性毒理作用。 方法: 1.翼首草正丁醇部位提取物制备:采用95％乙醇提取，正丁醇萃取方法。其主要成分的鉴定采用高效液相色谱法(HPLC)进行。 2.采用MTT法，检测翼首草正丁醇部位提取物对多种肿瘤细胞细胞活力的影响。 3.采用Hoechst33258染色和透射电镜观察凋亡细胞形态学改变。 4.采用PI染色流式细胞仪检测翼首草正丁醇部位提取物对肝癌细胞Hep3B周期分布的影响。 5.采用细胞平板克隆实验观察翼首草正丁醇部位提取物影响Hep3B细胞集落的形成。 6.采用AnnexinⅤ-FITC/PI双染流式细胞仪检测凋亡细胞百分比，评价翼首草正丁醇部位提取物对肝癌细胞Hep3B凋亡的影响。 7.采用ELISA Kit检测小鼠血清中Bcl-2、Bax水平。 8.采用Real-time PCR检测翼首草正丁醇部位提取物对肝癌细胞Hep3B的Akt、PI3K及Bcl-2、Bax在mRNA表达水平的影响。 9.采用Western blotting考察翼首草正丁醇部位提取物对肝癌细胞Hep3B对Akt/PI3K信号通路相关蛋白的调控作用，初步探讨该药的作用机制。 10.采用Hep3B裸鼠移植瘤模型，考察该药在体内的抗肿瘤作用。 11.采用急性毒理学实验，评价该药的急性毒副作用。 结果: 1.翼首草正丁醇部位提取物(YSC-ZDC)能抑制肺癌细胞株A549、食管癌细胞株Eca-109，肝癌细胞株HepG2和Hep3B的细胞活力，能阻滞Hep3B细胞于G1/S期，诱导细胞凋亡，均呈一定的量效关系。 2.形态学实验能明显观察到Hep3B细胞凋亡的特征性改变。 3.YSC-ZDC能显著抑制Hep3B细胞集落的形成。 4.YSC-ZDC能降低Hep3B细胞分泌Bcl-2、Bax及磷酸化Akt水平。 5.通过Real time-PCR及Western blot实验，证实了YSC-ZDC能在mRNA和蛋白表达水平上调控细胞凋亡，可能是通过调控Akt信号通路起作用。 6.细胞划痕实验和Transwell小室实验结果表明YSC-ZDC能抑制Hep3B细胞的转移和侵袭。 7.体内实验表明YSC-ZDC能抑制肿瘤的生长，通过免疫组织化学法研究同样证明了该药能诱导肿瘤细胞凋亡。 8.急性毒理实验表明该药的毒副作用较小，安全有效。 结论: 1.翼首草正丁醇部位提取物(YSC-ZDC)在体外能抑制多种肿瘤细胞生长的作用，具有一定量效关系，其机制可能与诱导肿瘤细胞凋亡及抑制细胞侵袭转移有关。 2.翼首草正丁醇部位提取物(YSC-ZDC)在裸鼠移植瘤模型体内能显著抑制肿瘤生长。 3.翼首草正丁醇部位提取物(YSC-ZDC)在小鼠体内的急性毒理实验表明该药的毒性作用较小，安全有效。