海南粗榧内生真菌及两种海洋来源微生物的化学成分研究

来源 :沈阳药科大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:xixijeffkol
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研究表明,植物内生真菌的代谢产物与宿主植物可能具有同源性,本文以具有抗癌活性的植物海南粗榧(Cephalotaxus hainanensis Li [C.mannii Hook. f.].)的内生真菌为研究对象,对其代谢产物及生物活性进行研究;另外,为了寻找新的活性化合物,本文以稻瘟霉和茄交链孢霉的分生孢子及菌丝体形态变化为活性指标,筛选出活性和遗传稳定性良好的一株真菌和一株放线菌,分别对其代谢产物进行研究。采用溶剂法和各种色谱法(硅胶柱色谱、葡聚糖凝胶柱色谱、制备薄层色谱及HPLC等)对这3种菌株的发酵液和/或菌丝体进行了化学成分研究。从海南粗榧(Cephalotxus hainanensis Li [C.mannii Hook. f.].)枝叶的内生真菌 L10(Colletotrichum sp.)的代谢产物中共分离得到33个化合物,并根据理化性质和波谱学特征鉴定了其结构,分别为:4-羟基苯乙醇-2’-(R)-羟基丙酸酯(L1),4-羟基苯乙醇-2’- (S)-羟基丙酸酯(L2),4-羟基苯乙醇-2’- (S)-羟基丙酸酯-2"-(S)-羟基丙酸酯(L3),4-羟基苯乙醇-2’- (S)-羟基丙酸酯-2"- (R)-羟基丙酸酯(L4),4-羟基苯乙醇焦谷氨酸酯(L5),4-羟基苯乙醇-3-氧代-2, 3-二氢-1H-吡呤-2-酯(L6),4-羟基苯乙酸(L7),4-羟基苯乙酸甲酯(L8),4-羟基苯乙醇(L9),4-羟基苯乙胺(L10),6-(1’-2’-二甲基氧环-1’)-4-甲氧基-3-甲基-2H-吡喃-2-酮(L11),6- (1-羟乙基)-4-甲氧基-3-甲基-2H-吡喃-2-酮(L12),Nectriapyrone(L13),Wermopyrone(L14),4-甲氧基-3-甲基-6-(2-甲叉-1-烯)-2H-吡喃-2-酮(L15), Harzialatone A(L16),补骨脂素(L17), 5-羟甲基糠醛(L18),异红介藜芦碱-3- O- α-鼠李糖-(1→ 4)-β-葡萄糖苷(L19),茄次碱- 3- O- α-鼠李糖-(1→ 4)-β-葡萄糖苷(L20),3-吲哚乙醇(L21),2, 2’-[1,1’-亚甲基双(1H-吲哚- 3, 1-二基)]二乙醇(L22),焦谷氨酸甲酯(L23),环苯丙脯氨酸二肽(L24),环丙亮氨酸二肽(L25),环丙异亮氨酸二肽(L26),环亮脯氨酸二肽(L27),邻苯二甲酸二丁酯(L28),鸟嘌呤(L29),尿嘧啶(L30),胸腺嘧啶(L31),腺苷(L32),葡萄糖(L33)。从采自南海潮间带红树林植物角果木(Ceriops tagal)的根际沉积物的真菌G20- 12(Trichoderma atroviride)的代谢产物中共分离得到30个化合物,并根据理化性质和波谱学特征鉴定了其结构,分别为:Atroviridetide(G1),4’-(4,5-二甲基-1,3-二醇-2-基)-甲基-苯酚(G2),(3’-羟基丁基-2’-基)-5-焦谷氨酸酯(G3), 3’-(3-氧代环戊烯-1-基)-丙酸丁酯(G4),3’- (3-氧代环戊烯-1-基)-丙酸甲酯(G5),环脯-天冬氨酸二肽正丁酯(G6),(E)-3- (5-羟甲基呋喃-2-基)-2-苯丙烯醛(G7),焦谷氨酸正丁酯(G8),2,3-二羟基苯甲酸(G9),α-羟基丙酸苯甲醚(G10), 4-羟基苯乙醇乙酸酯(G11),4, 5-二羟基己酸-γ-内酯(G12),4-羟基苯甲酸(G13),丁二酸(G14), α-羟基丙酸.(G15),环甘-脯氨酸二肽(G16),环苯丙-脯氨酸二肽(G17),环羟脯-脯氨酸二肽(G18),环亮-脯氨酸二肽(G19),环缬-脯氨酸二肽(G20),环异亮-脯氨酸二肽(G21),环缬-酪氨酸二肽(G22),环羟脯-苯丙氨酸二肽(G23),环亮-羟脯氨酸二肽(G24),环甘-苯丙氨酸二肽(G25),环丙-脯氨酸二肽(G26),环丙-亮氨酸二肽(G27),环丙-异亮氨酸二肽(G28),环丙-甘氨酸二肽(G29),环亮-酪氨酸二肽(G30)。从采自青岛的海洋放线菌TPF-4(Streptomyces tendae)的代谢产物中分离得到9个化合物并根据理化性质和波谱学特征鉴定了其中8个化合物的结构。已确定结构的化合物分别为:大黄素(T1),大黄酚(T2),芦荟大黄素(T3),3-羟基芦荟大黄素(T4),2, 5-二羟基苯乙酸(T5), 丁二酸(T6),尿嘧啶(T7),胸腺嘧啶(T8)。上述71个确定结构的化合物中,共有14个新化合物,其中化合物L1-L6为新的4-羟基苯乙醇酯类化合物,L11、L12为新的吡喃酮类化合物,L19为新的甾体生物碱类化合物,化合物G2、G3为含有2, 3- 丁二醇片段的新化合物,G1、G6为新的环肽类化合物。对部分化合物进行了体外肿瘤细胞抑制活性研究,药理模型为急性粒细胞白血病HL- 60细胞株和人前列腺癌PC- 3细胞。结果表明,仅化合物L2具有中等活性,其IC50分别为43.23 μM和63.09 μM;而其他化合物均无活性。本文使用三相系统成功的实现了差向异构体L3, 4的分离,对今后分离该类化合物提供实验依据。
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