香蕉细菌性软腐病菌的致病性和遗传分化及不同生长期粉蕉抗性的研究

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香蕉细菌性软腐病是严重威胁香蕉生产的细菌性病害,已被列入《中华人民共和国进境植物检疫有害生物名录》。2009年该病害在我国广东首次被发现,危害日趋严重,初步鉴定香蕉细菌性软腐病菌为Dickeya sp.。目前,国内外对香蕉细菌性软腐病菌的报道多见于培养性状、生理生化特性和防治方法等研究,而对菌株间的致病性分化和品种抗性的研究未见报道。本研究采用离体针刺接种粉蕉假茎和盆栽针刺接种粉蕉植株两种方法,对分离自广东珠海和南沙地区的14株香蕉细菌性软腐病菌进行致病性测定。结果表明,两种方法均可将供试的14个菌株的致病力划分为强(++++)、较强(+++)和中等(++)3个类型。在两种方法中,致病力强的菌株划分的结果都相同,致病力较强的菌株和致病力中等的菌株划分的结果基本一致。此外,本研究还发现,来源于同一地区的菌株之间有着相似的致病性,而来源于不同地区的菌株之间存在致病性的分化。通过细菌16S rDNA和看家基因gapA、mdh(?)勺序列分析,以及16S-23S rDNA转录间隔区PCR (ITS-PCR)和细菌基因组的重复序列PCR (Rep-PCR)技术,对香蕉细菌性软腐病菌的遗传分化进行了研究。结果表明,14株细菌与Dickeya的6个模式种的序列同源性均达到97%以上,绝大多数菌株的同源性可达99%以上,相似度较高。因此,利用细菌的16S rDNA,我们初步认为香蕉细菌性软腐病菌均属于Dickeya。对两个看家基因gapA和mdh的分析结果表明,绝大多数菌株间的同源性较高,菌株间存在明显的遗传分化现象;利用ITS-PCR扩增,可将供试菌株划分为6个组群;而利用细菌基因组重复序列通用引物BOX和J3进行Rep-PCR扩增,在遗传距离为0.52时,供试菌株可被划分为2个组群;在遗传距离为0.65时,供试菌株可被划分为4个组群。因此,通过对14个菌株的遗传分析表明,初步推断引起广东地区香蕉细菌性软腐病的病原菌存在遗传分化现象。已有研究表明,在我国主栽的7个香蕉品种中,粉蕉为中感品种。鉴于粉蕉的营养价值和经济价值,本研究选取致病性强的菌株(Xj7-1-4),接种于4个不同生长期(3个月生长期、6个月生长期、9个月生长期和一年以上的生长期)的粉蕉假茎,初步探究不同生育期粉蕉的抗性情况。结果表明,粉蕉在这4个生长期存在抗性的差异,其中,6个月生长期的粉蕉病情指数最高,12个月以上的成株期的粉蕉抗性最强。
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