【摘 要】
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目的：研究脂肪相关性microRNAs (miRNAs)对脂肪细胞分化过程及其脂肪特异性基因-脂联素蛋白表达水平及其mRNA表达水平的影响。方法：(1)用miRNA微阵列分析法筛选和鉴定3T3-L1脂
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目的：研究脂肪相关性microRNAs (miRNAs)对脂肪细胞分化过程及其脂肪特异性基因-脂联素蛋白表达水平及其mRNA表达水平的影响。方法：(1)用miRNA微阵列分析法筛选和鉴定3T3-L1脂肪细胞分化相关性miRNAs; (2)构建脂肪细胞分化相关性miR-145的高表达质粒并且在大肠杆菌中扩增；(3)将脂肪相关性miR-145的高表达质粒在脂质体(lipofectamineTM2000)介导下转染3T3-L1前体脂肪细胞,然后用“鸡尾酒法”诱导3T3-L1前体脂肪细胞分化为成熟的脂肪细胞,并用油红O染色鉴定脂肪细胞的形态。(4)Western Blot实验检测miR-145对脂肪特异性基因脂联素蛋白表达水平的影响。(5)RT-PCR实验检测miR-145对脂肪细胞分化特异性基因脂联素蛋白mRNA表达水平的影响。结果：1.3T3-L1脂肪细胞分化过程中miRNA表达谱发生明显改变,其中35个miRNAs下调,17个miRNAs上调；2.用脂肪相关性miR-145转染3T3-L1前体脂肪细胞并高表达后,脂肪细胞分化过程受到影响,miR-145明显促进脂肪细胞的分化与成熟；3.miR-145对脂联素mRNA和蛋白表达都有明显影响,提示miR-145对脂联素的调节是影响脂肪细胞分化过程的重要分子机制。结论：1.3T3-L1脂肪细胞分化过程中存在差异性表达的miRNAs,其中miR-145表达上调；2.miR-145可以促进脂肪细胞分化与成熟,其作用与促进脂联素表达密切相关。
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