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L-抗坏血酸棕榈酸酯(L-ascorbyl palmitate, L-AP)是一种脂溶性抗氧化剂,具有良好的自由基清除、抗氧化、抗衰老、抗癌抗肿瘤等营养保健功能,广泛用于含油食品、动植物油及高级化妆品中。然而,现有的商品化L-AP基本上都是通过化学方法合成的,存在环境污染大、副反应多、对设备要求高等缺点。生物酶催化技术具有反应条件温和、特异性高、环境友好、催化效率高等特点,尤其是近年来酶固定化技术的发展,克服了游离酶稳定性差、易变性、使用成本高、重复使用性差等方面的不足,使生物酶催化技术在生物或化学合成领域具有更明显的优势,尤其在非水相体系中有很好的应用前景。本研究采用固定化假丝酵母脂肪酶催化合成L-AP,主要考察并优化了固定化酶催化合成L-AP的条件,分析了产物L-AP和副产物水对L-AP合成的影响,并探究了固定化酶催化连续合成L-AP的可行性。主要研究结果如下：(1)以疏水PTFE/无纺布复合膜为载体,利用过滤—吸附—交联的组合固定化方法制备的固定化假丝酵母脂肪酶(Candida sp.1619)具有较好的储存稳定性和操作稳定性,常温储存380d后酶活力仍保持在初始酶活力的65%,固定化酶的使用半衰期为140-160h。(2)系统考察了溶剂、温度、时间、底物摩尔比与浓度、固定化酶用量、水活度等对L-AP合成的影响。结果表明,有机溶剂采用叔戊醇(20mL)、反应温度55℃、反应时间24h、底物摩尔比9：1、底物浓度0.79 mol·L-1、固定化酶用量100U,体系水活度维持在0.1-0.3时有利于L-抗坏血酸棕榈酸酯的合成,产物浓度达14 g·L-1。(3)产物L-AP和副产物水分对L-AP合成影响的研究表明,两者对固定化酶催化合成L-AP具有较明显的抑制作用。向体系中适时、适量加入分子筛脱水可促进L-AP的生成。本研究中反应8h后加入0.6g分子筛(4A),产物浓度达到25.9 g·L-1,比不加分子筛时提高了约80%。(4)对固定化脂肪酶连续催化合成L-AP的可行性进行了研究。结果表明,流量为45mL·min-1、即停留时间为2min时,有利于L-AP的合成；加入分子筛(4A)对体系进行脱水处理有助于L-AP的连续合成的进行,反应40h后L-AP浓度比未加分子筛的反应增加了约70%。