酪氨酸相关胺类神经递质在日本刺沙蚕脑中的表达分析

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目的本实验是以日本刺沙蚕Neanthes japonica作为实验的对象,用兔抗TDC2多克隆抗体、兔抗TA多克隆抗体、兔抗OA多克隆抗体、兔抗α1肾上腺素受体多克隆抗体对TA合成的限速酶TDC2和TA、OA和α1肾上腺素受体进行标记。以期提供酪胺、章鱼胺和去甲肾上腺素、肾上腺素存在的证据,以证明在低等无脊椎动物体内酪胺系统、章鱼胺系统和肾上腺素能系统是独立并存的。方法1、运用Western blot实验方法,检测TDC2、TA、OA、α1肾上腺素受体在日本刺沙蚕脑内是否有表达。2、CP包埋切片技术联合SP免疫组织化学方法,运用免疫组化技术,检测TDC2、TA、OA、α1肾上腺素受体在日本刺沙蚕中枢神经系统内的表达分布情况。结果日本刺沙蚕Neanthes japonica脑组织内TDC2、TA、OA和α1肾上腺素受体均表现出较强的阳性免疫反应。1、TDC2在细胞中主要分布在细胞膜上,极少部分位于细胞液中,而细胞核中基本不含有TDC2。2、TA以分布于细胞膜上为主,少量分布于细胞液和细胞核内。3、OA全部分布于细胞膜上。4、α1肾上腺素受体在细胞内主要分布于细胞膜上,细胞核中无分布,发现有四个充满整个胞体的阳性免疫结果。5、TDC2、TA、OA和α1肾上腺素受体均未在全脑中体现出明显的静脉曲张样的神经纤维或神经纤维束。结论本研究结果表明在日本刺沙蚕Neanthes japonica脑内可能共存独立的酪胺、章鱼胺和儿茶酚胺类神经递质。
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