中国和东盟作为世界上最主要的水果产地与消费市场之一,从20世纪90年代至今,双方的水果贸易发展一直处于良好发展态势。尤其是中国-东盟自由贸易区于2010年1月1日正式建成,进一步推动了中国和东盟水果进出口贸易的持续稳定增长。伴随贸易量的上升,我国检疫部门从东盟进境的水果中查获的检疫性有害生物也不断增加。其中粉蚧害虫作为水果上的重要害虫之一,因其危害严重、处理难度大等特点,受到大家广泛关注[1]。粉蚧是一类重要的世界性检疫性害虫,是蚧总科中的第二大科[2],对水果、蔬菜等的进出口贸易带来了巨大威胁。一般情况下,口岸检疫部门截获的粉蚧有很多是若虫甚至是残体,而且粉蚧存在隐存种且它们近缘种间的差异较小,对于基于形态学特征进行粉蚧害虫识别鉴定的及时性及准确性均造成极大影响[3]。粉蚧隶属于粉蚧科,英文名通称mealybugs,拉丁学名是Pseudococcidae,是一种小型吸汁昆虫。在全球都有分布,各种环境也均能适应。其雌虫为卵圆形,行动很迟缓,长大约1公分,体外附有白色的黏粉。雌虫、幼虫聚集在叶的背面。雄成虫的中胸有一对发达前翅,体的末端有发达生殖鞘[2]。粉蚧鉴定一般是对其雌成虫的形态进行观察,但由于制片过程繁琐,鉴定特征所需的识别要求要具备较强的专业性,此外无法对幼体、残体样本进行很好鉴定[4]。不少专家学者就开始将分子鉴定技术应用到蚧虫的研究领域,包括系统发育分析[5-6]、物种的识别鉴定[7-14]等。近年来以线粒体DNA(mitochondrial DNA,mt DNA)细胞色素C氧化酶亚基I的基因(cytochromec oxidase subunit I)作为分子标记,运用DNA条形码技术,对物种进行鉴定的报道也不断增多[15],当然也有一些关于是关于蚧虫。与此同时,一些专家学者发现28S基因序列也提供一些变异信的息,作为对COI条形码鉴定的补充,能提高鉴定蚧虫的准确率。DNA条形码是一段特殊的DNA序列,可用来进行物种的鉴定。我国口岸检疫部门每年从东盟国家入境水果中截获大量粉蚧,其中有很多是检疫性有害生物,但是由于粉蚧的个体微小,仅仅通过形态学方法无法进行及时准确的鉴定[16]。本文以凭祥口岸近年来进境水果截获的粉蚧为主要研究对象,研究了粉蚧的DNA条形码鉴定技术。研究获得11种粉蚧及无花果蜡蚧Ceroplastes rusci 77个个体的DNA条形码序列以及10种粉蚧和无花果蜡蚧C.rusci 48个个体的28SD2区域序列。利用MEGA6.0.6软件构建了系统发育树,并通过Kimura-2-parameter模型进行了遗传距离分析,以检验线粒体COI基因条形码序列对粉蚧种类鉴定的有效性。研究结果表明除了李比利氏灰粉蚧D.lepelleyi聚为2支,大洋臀纹粉蚧P.minor和橘臀纹粉蚧P.citri聚为1支外,其他粉蚧都能够通过DNA条形码进行有效的区分。基于28SD2序列NJ系统树拓扑结构基本与COI序列的相似,表明28S基因序列也可能能够用于多基因条形码鉴定技术。