口腔鳞癌不同治疗阶段口腔菌群的动态变化规律研究

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口腔鳞癌(Oral Squamous Cell Carcinoma,OSCC)具有局部侵袭性且发病率逐年增加。尤其是在发展中国家,男性患口腔鳞癌的现象较为普遍。口腔鳞癌最常见的致病因素是吸烟、酗酒和嚼槟榔。此外,一些口腔致病菌也可诱发其发生。口腔鳞癌已经成为严重危害人类生命健康的肿瘤疾病。口腔鳞癌患者通常在诊断时即是中晚期,加上预后不良,5年存活率不足60%。近年来,许多研究证明了口腔菌群和肿瘤发生具有相关性。因此本研究旨在通过对口腔菌群特征的研究,为患者的早诊早治提供依据,并初步探索在口腔鳞癌不同治疗阶段中数百种口腔细菌所起到的作用,为将来口腔鳞癌的治疗及预后提供参考。研究目的:研究口腔鳞癌不同治疗阶段的口腔菌群特征,初步探讨口腔鳞癌不同治疗阶段的口腔菌群动态变化规律和口腔菌群在口腔鳞癌发生发展过程中的作用,评价微生物作为口腔鳞癌诊断工具的可行性。研究方法:本研究通过随机纳入临床30例本院住院口腔鳞癌患者和随机10例门诊正常人群作为分析对象,分别采集口腔鳞癌患者和门诊正常人的口腔黏膜试子作为研究样本,同时详细记录其基本人口学资料,内容包括:年龄、性别、有无吸烟和酗酒习惯、肿瘤病理类型等。为口腔鳞癌患者制订统一的综合序列治疗方案,按照试剂盒的说明提取DNA再作PCR扩增,最后测序并对测序数据进行整理分析。研究结果:本研究利用16S rRNA测序对口腔鳞癌患者及门诊正常对照人群的口腔菌群多样性及动态变化规律进行了深入分析,结论如下:1.口腔鳞癌患者与正常人群比较口腔菌群的丰富度略有提高,但是我们不能单纯以口腔菌群多样性来反映健康程度。比较口腔鳞癌患者治疗前、化疗后、手术后及放疗后各个治疗阶段口腔菌群的差异,发现口腔菌群多样性显示无明显差异,同样提示我们不能单纯以口腔菌群多样性来反映健康状况。OTU主成分分析图表明口腔菌群在口腔鳞癌发展进程中确实发生了显著的整体转变,因此有理由怀疑口腔菌群的改变与口腔鳞癌的病因有关。2.通过分组对比,发现对于性别不同、年龄段不同、病理类型不同的口腔鳞癌患者,他们的口腔菌群均无显著性差异,我们认为年龄、性别、不同病理类型与口腔鳞癌患者口内菌群分布及数量无明显相关。排除性别、年龄、肿瘤不同病理类型等因素,比较口腔鳞癌患者治疗前和化疗一周期、二周期、手术后、放疗后各个治疗阶段口腔菌群差异,结果表明口腔菌群均无特异细菌变化。比较口腔鳞癌患者化疗一周期和化疗二周期、手术后、放疗后各个治疗阶段口腔菌群变化,结果显示口腔菌群均无特异细菌变化。比较口腔鳞癌患者化疗二周期和手术后、放疗后两个治疗阶段的口腔菌群差异,表明化疗二周期和手术后口腔菌群并无特异细菌变化。比较口腔鳞癌化疗二周期和放疗后口腔菌群变化,发现放疗后拟杆菌属(Bacteroides)和Mooorei菌相对丰度较高。比较口腔鳞癌患者手术后和放疗后这两个治疗阶段的口腔菌群变化,表明放疗后,在门、纲、目三个层级上富集梭杆菌(Fusobacteria)。本研究结果初步表明患者不同治疗阶段口腔菌群的变化规律是放疗后会引起显著差异,因为都是晚期病人,放疗后出现拟杆菌(Bacteroides)、Mooorei菌和梭杆菌(Fusobacteria)。通过查阅大量文献,有研究表明拟杆菌(Bacteroides)和梭杆菌(Fusobacteria)可通过调节肿瘤微环境或是刺激免疫细胞的免疫应答从而促进结直肠癌的发展,因此,我们推测拟杆菌(Bacteroides)、Mooorei菌和梭杆菌(Fusobacteria)可能也会促进口腔肿瘤发生,且与分期程度具有相关性。
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