番杏多酚的提取纯化及抗氧化活性研究

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本研究以吉林省新种植的新鲜番杏为原料,采用超声波技术辅助提取番杏中的抗氧化成分,利用大孔树脂对提取的多酚组分进行分离纯化,并对其抗氧化活性进行研究。本研究的结果可以为后期番杏资源的综合利用提供参考依据。本研究的主要内容及结论如下:(1)采用超声波技术辅助乙醇提取番杏中的抗氧化物质。分别研究超声时间、超声功率、液料比、超声温度等单因素对番杏中抗氧化物质活性的影响。在单因素试验的基础上,利用响应面法,优化番杏中抗氧化物质的提取工艺条件。以超声时间、超声功率、液料比、超声温度为影响因子,以DPPH自由基的清除率为响应值,根据中心组合Box-Benhnken试验设计原理,采用4因素3水平的响应面分析法,模拟得到二次多项式回归方程的预测模型。经分析得出,当以DPPH自由基清除率为指标时,番杏抗氧化物质的最佳提取工艺条件为:超声时间44min,功率200W,液料比5:1(m L/g),温度41℃,DPPH自由基的清除率可达到(89.81±0.32)%,此优化条件下番杏多酚的提取率可达(17.11±0.91)%,多酚含量可达(201.34±4.72)mg GAE/g干物质。(2)利用大孔树脂对番杏中的多酚类物质进行分离纯化。通过比较AB-8、D-101、X-5、ADS-17、ADS-7五种大孔树脂的静态和动态吸附试验,得出结论:优选出D-101大孔树脂对番杏多酚分离纯化。通过动态吸附和解吸试验,确定最优的吸附/解吸条件:浓度为8mg/m L的番杏多酚溶液,以2BV/h(1m L/min)的流速流过树脂床层,可以更好地完成饱和吸附,当加入4.7倍床体积的番杏多酚提取液时,开始出现泄漏;140m L的体积分数为90%的乙醇溶液,以2BV/h(1m L/min)的流速洗脱,解吸的效果较理想。通过热力学研究分析得出,D-101大孔树脂对番杏多酚的等温吸附过程符合Langmiur模型和Freundlich模型,其中Langmiur模型的拟合效果更好,拟合度可以达到0.99。(3)采用化学分析定性以及红外光谱分析,对番杏多酚活性成分进行检测分析。分离纯化并经喷雾干燥后的番杏多酚为淡绿色粉末,多酚的纯度可达到(75.1±0.6)%。检测分析明确了提取物的多酚特性,并根据红外光谱的波数分布,确定出酚类物质的特征基团。(4)对纯化前后的番杏多酚进行抗氧化活性研究。通过分析纯化前后番杏多酚的总还原能力,以及对DPPH自由基、超氧阴离子自由基和羟基自由基的清除能力,评价番杏多酚的抗氧化活性。结果表明,番杏多酚在各个评价方法中的抗氧化能力均随其浓度的增加而增强,且纯化物质的抗氧化活性均高于粗提物的活性,部分活性能够超过茶多酚的活性,与VC的抗氧化活性接近。
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