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目的：
1、比较GDM孕妇及正常孕妇血清雌激素脂肪酯(Estradiol fattyacidesters,E2-FAE)及游离雌二醇(Estradiol,E2)的差异,分析E2-FAE及E2与糖、脂代谢指标的相关性,探讨GDM的可能机理。
2、检测GDM孕妇及正常孕妇皮下脂肪组织中的激素敏感性脂肪酶(Hormone sensitive lipase,HSL)水平的变化,探讨HSL与糖、脂代谢的联系。
方法：
1、研究对象
选择中国医科大学附属盛京医院住院并分娩的孕晚期单胎足月孕妇31例为研究对象(孕前体质指数(BMI)=18.5～23.9kg/m2)。其中GDM孕妇14例(GDM组):孕妇年龄(33.29±5.89)岁,孕周(38.30±0.63)周,孕前体重指数(21.12±2.10)kg/m2,孕期体重增加(19.82±4.01)kg。正常无任何合并症与并发症孕妇17例(正常对照组):孕妇年龄(29.88±3.72)岁,孕周(38.79±0.73)周,孕前体重指数(19.83+2.17)kg/m2,孕期体重增加(19.00±4.97)kg。
2、收集标本
各组孕妇入院后空腹8～12小时,于次晨抽取肘静脉血5ml,提取血清,-80℃低温冰箱保存,待测定血清糖脂代谢指标、E2-FAE、E2。皮下脂肪标本于剖宫产手术中采集,立即放入液氮罐并转运到-80℃低温冰箱保存备用,待测定HSL蛋白表达。该研究得到中国医科大学伦理委员会批准同意,每位参加研究的孕妇均签订知情同意书。由于收集皮下脂肪组织有一定限制,GDM组收集皮下脂肪组织8例,正常组收集皮下脂肪组织9例。
3、测定指标及方法
(1)孕妇年龄、分娩孕周、收缩压(Systolicbloodpressure,SBP)、舒张压(Diastolicbloodpressure)、孕前体重、身高等基本信息从住院病历及询问病史中获得,空腹血糖(Fastingbloodglucose,FBG)、血清总胆固醇(Totalcholesterol,TC)、甘油三酯(Tdglyceride,TG)、低密度脂蛋白(Lowdensitylipoprotein,LDL)、高密度脂蛋白(HighdensitylipoproteinHDL),载脂蛋白A-I(ApoA-I),载脂蛋白B(ApoB)等指标查阅化验结果获得。
(2)改良铜试剂比色法测定血清游离脂肪酸(Freefatacid,FFA)水平。酶联免疫法测定血清空腹胰岛素(fastinginsulin,FINS)水平。采用HOMA稳态模型计算HOMA-IR,HOMA-IR=FBG×FINS/22.5,HOMA-IR数值越大表明胰岛素抵抗程度越重;
(3)采用时间分辨荧光免疫分析测定两组孕妇血清E2-FAE和游离E2浓度。比较两组孕妇血清E2-FAE和游离E2水平的变化,并分析其与糖、脂代谢指标之间的关系;
(4)Westernblot半定量法测量两组孕妇皮下脂肪组织HSL的蛋白水平表达,并分析其与血清糖、脂代谢指标之间的关系。
4、统计方法
采用SPSS17.0统计软件进行处理。计量资料以均数±标准差(-x±s)表示,两组间比较采用t检验,相关分析采用直线相关分析。以P＜0.05为差异有统计学意义。
结果：
1、GDM组FINS、HOMA-IR及FFA明显高于正常对照组(P=0.03,P=0.049,P=0.00)。患者年龄、孕周、孕前体重增长、DBP、SBP、TG、TC、LDL、HDL、FBG、ApoA-I、Apo-B水平在两组之间无明显差异(P＞0.05)。
2、血清E2-FAE、E2及血清E2-FAE/E2在两组之间差异无统计学意义(P＞0.05)。
3、血清E2-FAE水平与HOMA-IR呈正相关(r=0.43,P=O.02),E2水平与FBG呈正相关(r=0.40,P=0.03)。
3、GDM组皮下脂肪HSL蛋白表达明显低于正常对照组(P=0.02)。
4、皮下脂肪组织HSL蛋白表达与FFA、FINS、HOMA-IR及E2-FAE均呈负相关(r=-0.65,P=0.02;r=-0.70,P=0.01r=-0.59,P=0.04;r=-0.56,P=0.03)。
结论：
1、GDM孕妇存在高胰岛素血症、高胰岛素抵抗和高血中FFA。
2、GDM组和正常组血清E2-FAE和游离E2水平没有明显差异,但血清E2-FAE水平与HOMA-IR呈正相关。血清游离E2水平与FBG呈正相关,提示血清E2-FAE和游离E2与糖代谢可能存在联系。
3、GDM患者皮下脂肪HSL蛋白表达下降,且皮下脂肪组织HSL蛋白表达与FFA、FINS、HOMA-IR及E2-FAE均呈负相关,提示HSL可能通过脂代谢及E2-FAE的水解,影响胰岛素抵抗,参与GDM发病及发展。