补肾生精经典方药促进模型小鼠生精能力和生精干细胞相关基因表达的研究

来源 :北京协和医学院 中国医学科学院 清华大学医学部 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kfyddp
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目前全球男性生殖能力不断下降,约有10-15%的家庭面临生育难题,这已经成为公认的社会健康问题。对精液质量的干预研究已经成为生殖医学科学发展的国际前沿之一,有重要的学术意义和应用前景。   临床研究证实,五子衍宗、金匮肾气、左归丸和右归丸等补肾生精经典方剂在男性精液质量和男性生育力促进方面具有明确的作用。本研究主要通过白消安致NIH、ICR、Balb/c雄性小鼠生精障碍/无精子模型,对五子衍宗、金匮肾气和左归丸、右归丸促进生精能力的作用进行了研究。主要研究结果如下:   1、生精障碍/无精子模型的建立   分别对NIH、ICR、Balb/c3个品系小鼠腹腔注射白消安,可见小鼠在造模后动物外观体征、造模成功率(死亡率、存活率)、体质量等方面具有明显差异,白消安对NIH动物产生的损伤更明显,受到的损伤恢复最慢,ICR和Balb/c小鼠表现基本接近;且白消安在35mg/Kg可严重损伤生精细胞。   2、对生精能力的影响   五子衍宗、金匮肾气和左归丸、右归丸均可提高精子数目,促进精子生成。以右归丸和五子衍宗丸作用效果最强,金匮肾气丸作用次之;左归丸和右归丸可显著促进精子活力。   3、对生精干细胞的影响   免疫组织化学结果显示:通过10个随机视野中阳性细胞总数、所有精曲小管的规范横切面中阳性细胞平均个数和图像分析获得的阳性细胞所占全部精曲小管中细胞百分率这3个评价指标,表明五子衍宗、金匮肾气和左归丸、右归丸均可增加c-kit阳性细胞和Oct-3/4阳性细胞数目,说明4种方药具有增强生精干细胞分裂活性的作用。   4、对睾丸全基因表达谱的研究   在分析的3万余个基因中:   ①五子衍宗丸差异表达2倍以上的明显上调基因占1.12%,下调基因占1.54%,差异表达4倍、5倍以上的上调基因和下调基因分别27个、9个和72个、23个,提示以负向抑制/下调作用为主;   ②金匮肾气丸明显上调基因占1.63%,下调基因占0.90%,差异表达4倍以上的上调基因127个,下调基因7个,提示以正向促进/上调作用为主;   ③与正常对照组比较,五子衍宗丸以下调基因为主,金匮肾气丸以上调基因为主;   ④五子衍宗丸和金匮肾气丸比较以基因下调为主,2方药可以共同上调32个基因,共同下调12个基因。   5.对生精细胞相关基因的表达影响   利用Real-time PCR技术对睾丸组织生精/生精干细胞相关基因mRNA表达水平的检测结果显示,与自然恢复对照组比较,4个中药组中SCF、c-kit基因mRNA相对表达量均有一定程度的增加,其中五子衍宗丸组显著增高,其次是右归丸组,结果提示该2药促进生精/生精干细胞的表型与SCF/c-kit系统相关。   综上所述:五子衍宗、金匮肾气和左归丸、右归丸对生精细胞/生精干细胞具有正向促进作用。
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