基于石蜡切片技术的家蚕胚胎发育与Mago蛋白定位研究

来源 :西南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yetigai
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
探索并建立适合家蚕卵的石蜡切片技术体系;获得家蚕典型胚胎发育时期的显微实体照片,印证补充前人关于家蚕胚胎发育的文字描述、示意图或手绘图,为家蚕胚胎发育基因功能研究提供形态学参考照片;探索并初步建立家蚕免疫组化技术体系,为在组织和细胞水平研究基因功能奠定基础。以KOH溶液作为卵壳软化液,设置浓度梯度和软化时间梯度,摸索最佳软化时间;摸索适合家蚕卵的固定、透明、染色方法;利用已建立的石蜡切片技术体系,以不同发育时期的家蚕日系N4品种非滞育卵为材料进行石蜡切片,获得较为系统的典型胚胎发育时期的显微实体照片;以家蚕日系N4品种5龄3天幼虫精巢为材料,以家蚕Mago蛋白IgG为Ⅰ抗,摸索免疫组化方法,建立免疫组化技术体系,获得家蚕Mago蛋白组织定位信息。研究结果如下:1.以家蚕日系N4品种非滞育卵为材料,用10%KOH溶液软化卵壳5min,用Smith液固定,用松油醇(Terpineol)脱水兼透明,建立了家蚕卵石蜡切片技术体系。2.获得了较为系统的家蚕典型胚胎发育时期的实体照片,这些时期包括胚盘形成、胚带形成、中胚层分化、头胸部突起显现、腹部突起显现、反转前、反转、反转后、器官形成等典型发育时期。还观察到了卵黄细胞的形成过程,区分了合胞体胚盘和细胞胚盘,得到了胚胎中肠、背血管、神经索、生殖腺、丝腺等组织图片。用连续切片技术观察到了类原始生殖细胞存在于中胚层突起处。3.影响免疫组化结果的因素主要有抗体的纯度,Ⅰ抗和Ⅱ抗最佳稀释度组合,抗原修复、封闭、洗涤、抗体孵育、显色等步骤的时间等。本研究确定的Ⅰ抗和Ⅱ抗最佳稀释度组合为Ⅰ抗1:1000,Ⅱ抗1:500。4.家蚕Mago蛋白精巢组织的免疫定位结果表明,家蚕Mago蛋白存在于整个精巢组织中,但主要位于精母细胞、精子束细胞和结缔组织细胞的细胞核内。总之,通过本研究,建立了一套家蚕卵石蜡切片技术体系,具有简便、快速、完整性好、能大批量进行切片等优点,能够满足家蚕胚胎发育基因功能研究的需要;获得了较为系统的家蚕典型胚胎发育时期的实体照片,印证补充了前人关于家蚕胚胎发育的文字描述、示意图、手绘图;探索了家蚕免疫组织化学技术,并对其中的关键环节进行了探讨和标准化,初步建立了一项可重复、稳定性好、适合家蚕组织的蛋白定位方法,获得了家蚕Mago蛋白在家蚕精巢组织的定位结果。
其他文献
中国裘皮市场前景看好欧洲与其他地方一样,裘皮饰边时装十分流行,在一些裘皮买量低的国家如英国等,目前供销的裘皮饰边服饰也有很好的销益,如裘皮连帽大衣、裘皮饰边开士米外
目的:通过运用润肺调脾汤治疗小儿支原体肺炎气阴两虚证,观察润肺调脾汤的有效性、能否缩短疗程及能否降低复发率。方法:选择符合中医和西医临床诊断标准(小儿肺炎支原体肺炎气阴两虚证)的92例入选病例作为研究对象,随机分为治疗组46例,对照组46例。治疗组:在给予阿奇霉素肠溶片口服的基础上,加用中药润肺调脾汤口服。对照组:给予阿奇霉素肠溶片口服。两组疗程14天。结果:经治疗后,疾病疗效判定结果为治疗组总效
从上世纪80年代始.我先是参加民革.在省市民革荣任领导职务.并担任民革中央委员三届。后又调吉林省政协任副秘书长,在市、省及全国政协任委员前后共七届。期间.中共中央颁发了14号
以绝缘材料厂活性污泥作为研究材料,以期获得一些酶活较高的苯酚降解菌.试验采用苯酚为唯一碳源的培养基进行筛选、16S rDNA序列扩增与序列测定以及构建系统发育树的方法进行
阐述了UASB-SBR组合工艺处理啤酒废水的工艺流程,实践表明,UASB-SBR系统具有运行稳定、费用低、抗冲击负荷强等优点。
目的研究胶凝材料用量、胶水质量比和再生粗骨料取代率对高品质再生粗骨料混凝土工作性和力学性能的影响,对其配合比进行优化后,以实现再生骨料的最大化工程应用.方法采用线
<正>寺院是个特殊机构,它在现代佛教发展的困境,存在着佛教寺院管理理念和模式的合理调适问题,这包括寺院管理的目标设定等问题。探索佛教在复杂的社会环境里,如何基于寺院这
目的探讨外伤性脑梗死患者血小板计数(PLT)、体积(MPV)、压积(PCT)及分布宽度(PDW)的变化。方法对57例外伤性脑梗死患者和98例未发生脑梗死的颅脑外伤患者的PLT、MPV、PDW、P
目的探讨出血性脑瘤卒中的临床与CT表现以获取早期诊断的依据。方法结合文献复习,回顾性分析12例出血性脑瘤卒中的临床与CT表现。结果出血性脑瘤卒中临床分型有:Ⅰ型以脑卒中
2017年,习近平总书记在中国共产党第十九次代表大会上强调,要加大力度保障和改善民生,使人们的获得感、幸福感更加充实、更有保障、更可持续。而在当前“关系”色彩浓厚的社