N-乙酰半胱氨酸对大鼠缺血再灌注脑损伤保护作用的研究

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目的探讨新型抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)对大鼠缺血再灌注脑损伤(cerebral ischemia-reperfusion injury,CI/RI)的保护作用。方法利用改良Longa线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型。66只健康雄性SD大鼠(3-5月龄,体重250克-300克)随机分为正常对照组(A组),假手术组(B组),缺血再灌注组(C组)和NAC治疗组(D组),其中,缺血再灌注组又分为缺血再灌注6小时组,12小时组,24小时组,48小时组和72小时组;NAC治疗组分为24小时组和48小时组。缺血再灌注组和NAC治疗组于缺血2小时实行再灌注。NAC治疗组于大脑中动脉栓塞前30min腹腔注射NAC150mg/kg,并隔24小时后再次腹腔注射NAC150mg/kg(48小时组),缺血再灌注组同时注射等剂量生理盐水,缺血再灌注组,NAC治疗组相应时间点处死取脑,正常对照组立即处死取脑,假手术组手术后24小时处死取脑。缺血再灌注组,NAC治疗组大鼠观察比较神经功能缺损评分,脑梗死面积;比较c-fos蛋白和survivin蛋白免疫组化阳性细胞数。同时动态观察缺血再灌注组中大鼠c-fos蛋白和survivin蛋白免疫组化阳性细胞数的变化。结果1. NAC治疗组大鼠的神经功能缺损评分明显优于缺血再灌注组(P<0.05);2.脑梗死面积明显小于缺血再灌注组(P<0.01);3. survivin蛋白的免疫组化阳性细胞数明显多于缺血再灌注组(P<0.05),而c-fos蛋白免疫组化阳性细胞数明显少于缺血再灌注组(P<0.01)。4.随着时间的变化,缺血再灌注组中大鼠c-fos蛋白免疫组化阳性细胞数逐渐减少,c-fos蛋白的表达在缺血再灌注6小时表达最多,72小时少量表达。survivin蛋白免疫组化阳性细胞数逐渐升高,在缺血再灌注48小时表达最多,72小时仍有明显表达。结论1. N-乙酰半胱氨酸能够显著缩小大鼠局灶性脑缺血再灌注模型的脑梗死面积,减轻神经功能缺损,具有神经保护作用,其机制可能与抑制神经元凋亡并间接促进survivin蛋白的表达有关。2. c-fos蛋白和survivin蛋白在缺血再灌注脑损伤中的表达随时间的推移有各自的特点,c-fos可能与神经损伤有关,而survivin可能与神经修复有关。
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