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背景：由于缺乏有效的体外乙肝病毒感染的模型,乙肝病毒入胞早期过程的研究进展十分缓慢,在一定程度上影响了乙型肝炎及其相关肝脏疾病的基础和临床研究。越来越多的研究表明受体在病毒入胞过程中发挥了一定的作用。目的：建立一个I-IBV体外自然感染HepG2细胞的模型,探讨与HBV入胞相关的分子和受体。方法：收集]3BeAg阳性、高拷贝(HBV-DNA>1×108copies/ml)乙肝病人血清；未注射过乙肝疫苗的乙肝两对半全阴的正常人血清；以及2.2.15细胞上清。用PEG沉淀和蔗糖密度梯度离心得到去除病毒的高拷贝病人血清和2.2.15细胞病毒颗粒。将高拷贝血清和2.2.15细胞的病毒混合物作为实验组,正常人血清和2.2.15细胞的病毒混合物作为阴性对照组,和HepG2细胞共孵育,用DMSO处理六天的HepG2细胞加实验组血清作为阳性对照组。24h后去除旧培养基,PBS清洗3次,胰酶消化重悬继续孵育。收集去感染后细胞上清和细胞。ELISA检测细胞培养上清中的HBsAg, PCR方法检测细胞培养上清中的HBVDNA,电镜观察细胞上清中的病毒颗粒,组织化学、共聚焦和western blot观察细胞中的HBcAg。然后利用抗体中和方法中和血清中的IL-2, IL-12,定量PCR观察进入细胞的HBcAg的mRNA。用RNA干扰降低HepG2细胞表面的ASGR1或者CAV-1含量,PCR、western blot方法观察细胞内HBcAg含量。结果：HBV高拷贝血清作为实验组自然感染的HepG2细胞上清中, ELISA检测到HBsAg并且持续到120h,PCR检测实验组细胞上清中的HBV DNA呈阳性,免疫电镜可以观察到细胞培养上清中Dane样颗粒和20nm左右的杆状颗粒和球形颗粒。共聚焦、组织化学、Western Blot观察到细胞内的HBsAg和HBcAg。用抗体中和血清中IL-2后RT-PCR方法检测发现细胞内HBcAg mRNA发达也减低。RNA干扰细胞膜上的ASGR1和cav-1后,用RT-PCR和WB检测细胞内HBcAg, mRNA水平和蛋白水平的核心蛋白的表达均有所下降。结论：建立了HBV阳性血清直接感染HepG2细胞的模型,IL-2, ASGR1,CAV-1在HBV入胞时发挥作用。