阿司匹林诱导自噬抑制胃癌细胞生长的研究

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目的:探讨阿司匹林诱导自噬对胃癌细胞生长的抑制作用,并初步分析其可能的作用机制。方法:(1)用不同浓度的阿司匹林处理人胃癌细胞株SGC-7901、BGC-823,MTT法检测胃癌细胞活性;(2)流式细胞仪检测胃癌细胞凋亡和细胞周期变化;(3)Hoechst33258染色法检测细胞核形态学变化;(4)Transwell迁移实验检测细胞迁移;(5)激光共聚焦扫描显微镜检测细胞内自噬体的形成;(6)Western blot检测LC3-Ⅱ蛋白表达。结果:(1)MTT法结果表明阿司匹林对人胃癌细胞株BGC-823、SGC-7901具有明显的抑制作用,且随着阿司匹林药物浓度(1mM、2mM、4mM、6mM、8mM、10mM)的增加细胞存活率下降,呈明显的剂量效应关系(IC50约为6mM,P<0.01);(2)流式细胞术结果表明阿司匹林在48h内不能诱导胃癌细胞凋亡增加,但能够诱导胃癌细胞周期阻滞在G1期(P<0.05);(3)Hoechst33258染色法检测细胞核形态学变化结果显示胃癌细胞细胞核内的DNA未被酶裂解片段化,未见凋亡小体,未见碎块状的浓密亮蓝色,与流式细胞仪检测细胞凋亡的结果一致;(4)Transwell迁移实验结果显示:SGC-7901空白组201.67±6.51、5mM组96.67±6.43,BGC-823空白组96.00±4.58、5mM组45.67±7.09。阿司匹林能够显著抑制两株胃癌细胞的迁移能力(P<0.001);(5)激光共聚焦扫描显微镜和Western blot检测发现阿司匹林处理后胃癌细胞内自噬体增加,自噬蛋白LC3-Ⅱ表达增加,激活细胞自噬。结论:(1)阿司匹林能够显著抑制人胃癌细胞株SGC-7901、BGC-823的增殖,呈明显剂量效应关系;(2)阿司匹林可以使人胃癌细胞株SGC-7901、BGC-823的细胞周期停滞在G1期,其作用机制可能与激活细胞自噬有关。
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