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目的:探讨不同浓度的孕激素(P)对P受体(PR)阴性的子宫内膜腺癌细胞系JEC体外生长的影响。
方法:选用人子宫内膜腺癌细胞系JEC进行体外培养,加入含不同浓度P的培养液,用细胞计数、四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色和流式细胞术(FCM)的方法,观察子宫内膜腺癌细胞系JEC细胞的增殖活性和细胞周期时相变化;采用流式细胞术,检测JEC细胞的细胞周期调控蛋白P21的表达。
结果:(1)细胞计数法观察细胞增殖:用浓度为10<-4>、10<-5>、10<-6>、10<-7>、10<-8>mol/L的P作用于JEC细胞96小时,细胞数比对照组明显下降(P<0.05),并且随浓度增加,细胞数也逐渐减少;当浓度为10<-9>、10<-10>mol/L时,P无明显作用(P>0.05)。10<-4>、10<-5>和10<-6>mol/L的P作用96小时的细胞数相比,10<-4>和10<-5>组明显低于10<-6>组(P<0.05,但10<-4>组和10<-5>组之间没有差别(P>0.05)。(2)MTT法观察细胞增殖:不同浓度P作用24小时和48小时,其OD值无明显变化(P>0.05);作用72小时,10<-4>、10<-5>、10<-6>、10<-7>mol/L组0D值明显低于对照组,且差异显著(P<0.05),而作用96小时时,10<-4>、10<-5>、10<-6>、10<-7>、10<-8>mol/L组0D值明显低于对照组,差异均显著(P<0.05),但10<-9>、10<-10>mol/L组的0D值和对照组相比无明显变化(P>0.05);实验组中,10<-4>组和10<-4>组明显低于10<-6>组(P<0.05),但10<-4>组和10<-5>组之间没有差别(P>0.05)。(3)流式细胞术对细胞周期分析:10<-5>mol/L的P作用72小时,对照组和P组的G<,0>/G<,1>期细胞分别是70.18%和80.63%,S期及G<,2>/M细胞则由29.82%减少到19.37%;96小时,对照组和P组的G<,0.>/G<,1>期的细胞分别是77.41%和85.59%,S期及G<,2>/M细胞由22.59%减少到14.41%。统计学结果均表明显著差异(P<0.5)。(4)流式细胞术检测JEC细胞的p21的结果显示,经96小时培养,P作用组和无P作用组的JEC细胞荧光强度分别是3.45和3.48,二者没有差别(P>0.05);另外,两组分别与各自的阴性对照之间也没有差别(P>0.05)。
结论:PR阴性的JEC细胞生长可受到P的调控,一定浓度的P对JEC细胞的生长有明显的抑制效应,这种作用具有剂量和时间效应性;对p21的检测提示,P对PR阴性JEC的调控机制与p21无关。