心力衰竭(心衰)是多种心血管疾病发展的终末阶段，同时是多种疾病引发死亡的重要原因。其中，冠心病导致的心肌缺血始终是引发心衰的首要因素之一。目前针对心衰机制的研究较多，其中神经体液兴奋机制已普遍被接受，该机制认为心衰早期交感神经系统最先被激活，随之带动肾素—血管紧张素—醛固酮系统、下丘脑-垂体系统、细胞因子和肽类信号系统的激活，多因素共同作用不断加重心衰的病理过程。临床研究证实小剂量的β1受体阻断剂可明显降低慢性心衰病人的死亡率。因此，心衰时交感神经活动增强的机制已成为心衰研究的焦点之一。神经解剖学证实脊髓交感节前神经元接受重要的心血管中枢—下丘脑室旁核(PVN)神经元活动的调节，Kang等人发现心衰时该中枢肾素-血管紧张素系统(RAS)、炎性细胞因子(PIC)及氧化应激反应增强并明显影响外周交感神经放电，心功能随之恶化。但导致中枢内这些体液因子变化的因素尚未确定。以往的研究发现核转录因子-κB(NF-κB)是细胞内调节炎症及应激反应的重要因子之一，许多因素可以使胞浆内的IκB激酶(IKK)发生磷酸化，进而使抑制性蛋白IκB发生磷酸化并从NF-κB解离，暴露NF-κB的活性部位(p50或p65)，与核内目的基因的启动子或增强子上特定的κB位点结合，启动和调控目的基因的转录。研究证明NF-κB对RAS、PIC及部分超氧化物的生成有至关重要的调节作用，但它在心衰时PVN区域的作用尚未见报道。 本研究首先探讨了PVN区域的NF-κB是否参与了心衰时外周神经体液的兴奋作用。取体重在250～275克之间的雄性SD大鼠，首先接受侧脑室插管术(通过此路径给药)，2天后制作心衰动物模型或假手术模型，方法：经气管插管连接呼吸机，开胸结扎冠状动脉左前降支(假手术组不必结扎)，关胸后大鼠给予正常饲养，同时经侧脑室插管连接渗透压泵给予干预药物-SN50(NF-κB作用的抑制剂，2μg/h．ICV)或空白对照药物(vehicle，人工脑脊液，0.25μl/hr．ICV)。4周后，测血流动力学观察心功能；计算右心室/体重比(RVW/BW)，肺/体重比(lung/BW)反映左心前负荷变化；取脑组织及外周血，观察PVN区域神经元激活情况(Fra-LI的表达)，NF-κB亚基p50以及NF-κB激活标志物之一p-IKKβ(磷酸化IκB激酶)的表达，测量外周血去甲肾上腺素(NE，代表交感神经活动情况)和血管紧张素Ⅱ(ANGⅡ，代表外周体液因素的变化)的水平。结果：心衰大鼠与假手术大鼠比较心功能明显低下(左室舒张末期压力LVEDP，±dp/dtmax比较，P＜0.05)，左心前负荷升高(RVW/BW，lung/BW，P＜0.05)，PVN区域的Fra-LI、NF-κBp50以及p-IKKβ表达增加(P＜0.05)，外周血NE和ANGⅡ升高(P＜0.05)；接受SN50治疗的心衰大鼠与vehicle治疗的心衰大鼠比较，LVEDP，RVW/BW和lung/BW有所降低(P＜0.05)，±dp/dtmax升高(P＜0.05)，PVN区域的Fra-LI、NF-κBp50以及p-IKKβ表达减少(P＜0.05)，外周血NE和ANGⅡ下降(P＜0.05)。结论：以上结果说明心衰时PVN区域的NF-κB被明显激活并参与了心衰时外周神经体液兴奋机制。 随后，本研究更进一步探讨了心衰时PVN区域的NF—κB是否通过促进局部RAS、PIC及超氧化物的生成参与了心衰时外周神经体液的兴奋作用。采用的研究方法基本与第一部分相同，侧脑室给予的干预药物分别包括：洛沙坦(LOS，AT1—R阻断剂，20μg/h．ICV)，己酮可可碱(PTX，TNF—α合成抑制剂，10μg/h．ICV)，tempol(TEMP，氧化物清除剂，80μg/h．ICV)，SN50或vehicle。结果：1)4周后，LOS与SN50的治疗均降低了心衰大鼠的LVEDP，RVW/BW和lung/BW(P＜0.05)，±dp/dtmax升高(P＜0.05)，外周血NE和ANGⅡ(P＜0.05)，LOS减少了PVN区域的NF—κBp50，p—IKKβ以及血管紧张素转换酶(ACE)表达(P＜0.05)，SN50下调了PVN区域ACE表达(P＜0.05)，该结果说明心衰时PVN区域的RAS参与了NF—κB的激活，NF—κB进一步促进了中枢RAS的神经体液兴奋作用；2)4周后，PTX与SN50的治疗均降低了心衰大鼠的LVEDP，RVW/BW和lung/BW(P＜0.05)，±dp/dtmax升高(P＜0.05)，外周血NE和ANGⅡ(P＜0.05)，PTX减少了PVN区域的NF—κBp50，p—IKKβ，TNF—α以及IL-1β表达(P＜0.05)，SN50下调了PVN区域TNF—α和IL-1β表达(P＜0.05)，该结果说明心衰时PVN区域的PIC参与了NF—κB的激活，NF—κB进一步促进了中枢PIC的神经体液兴奋作用；3)4周后，TEMP与SN50的治疗均降低了心衰大鼠的LVEDP，RVW/BW和lung/BW(P＜0.05)，±dp/dtmax升高(P＜0.05)，外周血NE和ANGⅡ(P＜0.05)，TEMP减少了PVN区域的NF—κBp50，p—IKKβ，DHE以及gp91phox表达(P＜0.05)，SN50下调了PVN区域DHE以及gp91phox表达(P＜0.05)，该结果说明心衰时PVN区域的氧化应激反应参与了NF—κB的激活，NF—κB进一步促进了中枢超氧化物的神经体液兴奋作用。 结论：综合以上结果说明： 1、心衰时PVN区域的NF—κB被明显激活并参与了心衰时外周神经体液兴奋的机制； 2、心衰时PVN区域的RAS参与了NF—κB的激活，NF—κB进一步促进了中枢RAS的神经体液兴奋作用； 3、心衰时PVN区域的PIC参与了NF—κB的激活，NF—κB进一步促进了中枢PIC的神经体液兴奋作用； 4、心衰时PVN区域的氧化应激反应参与了NF—κB的激活，NF—κB进一步促进了中枢超氧化物的神经体液兴奋作用。心血管中枢PVN区域的NF—κB对心衰的发生发展起着至关重要的推动作用。 胰岛的内分泌活动受自主神经调节，有研究认为自主神经功能异常可能是加重糖尿病的原因之一，其中包括交感神经的激活。为了深入探讨交感神经在2型糖尿病中的作用机制，本研究采用化学性交感神经阻断术来降低外周交感神经活动，即实验动物静脉给予6—羟基多巴胺(6—OHDA；100mg/kg)，观察胰岛素分泌的变化，心功能和肾功能的改变，并探讨其可能机制。雄性SD大鼠(80-100g)给予高脂饮食，6周后，空腹状态下大鼠腹腔注射链尿佐菌素(STZ，35mg/kg，i．p．)制作2型糖尿病大鼠模型，对照组大鼠给予正常饮食，腹腔注射柠檬酸盐缓冲液。2天后取空腹血测血糖和胰岛素，同时静脉一次性注射6—OHDA或对照药物(vehicle，PBS溶解的维生素C溶液)。此后，所有实验大鼠给予正常饮食。4周后，免疫组化方法观察多巴胺—β—羟化酶(DBH，反映交感神经活动的指标)在胰岛、心脏和肾脏的表达，以证实这些组织内的交感活动被降低；取大鼠空腹静脉血，测血糖，胰岛素，肾功能指标(血尿素氮、肌酐)；血流动力学测大鼠心功能(LVEDP和±dp/dtmax)；免疫组化方法检测心脏PKC—βⅡ和肾脏TGF—β。Westernblot检测肾脏TGF—β。 结果显示: 6—OHDA降低了DBH在糖尿病大鼠和正常大鼠胰岛、心脏和肾脏的表达；vehicle治疗组糖尿病大鼠血糖、尿素氮和肌酐水平明显高于6—OHDA治疗组糖尿病大鼠，而胰岛素水平在两组间无明显差异；6—OHDA治疗组糖尿病大鼠心功能较vehicle治疗组糖尿病大鼠明显改善。糖尿病大鼠心脏PKC—βⅡ和肾脏TGF—β表达均高于正常大鼠，6—OHDA有效地降低了二者的表达。 上述研究结果提示： 1、阻断交感神经的作用能增加胰岛内β细胞的数量，但不能提高胰岛素的水平； 2、2型糖尿病早期，交感神经活动可诱导心肌PKC—βⅡ的表达，其结果促进心功能的减退； 3、2型糖尿病早期，交感神经活动可诱导肾脏TGF—β的表达，其结果促进肾功能的减退。