茄子(Solanum melongena L.)花药培养诱导单倍体植株的研究

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茄子花药培养是获得单倍体植株的重要途径,通过该技术可以缩短育种年限、快速获得纯合体。本试验通过观察茄子花蕾解剖结构,得出花粉发育时期与外部形态特征的对应关系,并以12个茄子材料为试材,研究了基因型、植物生长调节剂种类与浓度、接种密度、活性炭、取材时期等因素对茄子花药培养获得单倍体植株的影响,得到了一个茄子花药一步成苗方法,可为加速茄子花药培养的应用研究及单倍体育种奠定基础。其结果如下:1通过石蜡切片观察花蕾外部形态与花粉发育时期的对应关系,找到了单核靠边期花蕾外部形态标志为:萼裂基部差为1~2mm,花药黄绿色。2基因型是决定花药培养成功与否的关键因素。不同茄子材料在相同培养基上花药培养的效果不同,愈伤组织诱导率、出胚率及成苗率均存在明显差异。12个茄子材料中H1、H149-1在胚状体途径和器官发生途径中都诱导产生了再生植株,H2、H49-1只在胚状体途径中诱导产生了再生植株。3通过对愈伤组织诱导和分化的研究发现,适宜愈伤组织诱导的激素为0. Olmg·L-12,4-D+2mg·L-1KT+lmg·L-1BA+O.5mg·L-1NAA,适宜芽分化的激素为2mg·L-1KT,适宜诱导根的激素为0~0.1mg·L-1NAA。4通过对胚状体诱导的激素、活性炭等影响因素的研究发现,适宜的激素为2mg·L-1KT,适宜的活性炭浓度为0.1g·-1,适宜的接种密度为15枚花药/皿。5通过比较器官发生途径与胚状体途径产生的再生植株的倍性发现,胚状体直接成苗途径得到的单倍体再生植株的比率为100%,胚状体二次愈伤化再生的植株单倍体的比率为40%。而通过愈伤组织再生的单倍体植株的比率只有25%。诱导成苗时间上,胚状体途径直接成苗仅需70~80天,而通过愈伤组织途径需要90-100天。可见一步成苗比愈伤途径要更利于生产生的应用。6得到了一步诱导获得单倍体植株的茄子花药培养方法:选取适温下健壮无损伤的萼裂基部差在1~2mm的花蕾,4℃预处理1天,以15枚花药/皿接种于MS+2mg·L-1KT+3%蔗糖+7g·L-1琼脂培养基上,在36℃下热激6天,之后转入光下培养,35天可见到肉眼可见的胚状体,45天即可将具有根茎叶的幼苗转入相同培养基中继续生长,待苗长至瓶口时逐渐揭膜炼,移载,常规管理。通过此方法可以一次得到完整的胚植株,成苗率高,步骤简单,成本低,适于应用。
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