【摘 要】
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背景水痘-带状疱疹病毒（Varicella-Zoster Virus,VZV）是一种典型的人类疱疹病毒,对于皮肤、神经、淋巴细胞存在天然易感性,初次感染后可引起水痘,随后潜伏于背根神经节（Dorsal root ganglion,DRG）中,再次激活可导致带状疱疹。目前关于VZV潜伏感染及再激活机制的研究尚未有明确定论。自噬通常被认为是一种降解细胞内异常物质或外来物的机体自我保护手段,一些研究已在
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背景水痘-带状疱疹病毒（Varicella-Zoster Virus,VZV）是一种典型的人类疱疹病毒,对于皮肤、神经、淋巴细胞存在天然易感性,初次感染后可引起水痘,随后潜伏于背根神经节（Dorsal root ganglion,DRG）中,再次激活可导致带状疱疹。目前关于VZV潜伏感染及再激活机制的研究尚未有明确定论。自噬通常被认为是一种降解细胞内异常物质或外来物的机体自我保护手段,一些研究已在疱疹病毒感染的皮损组织及体外细胞实验中探究了疱疹病毒与自噬之间的关系。目的建立VZV感染豚鼠背根神经节的动物模型以建立VZV体内感染体系,证实豚鼠背神经节神经元细胞中自噬的发生,在动物水平上明确VZV感染和自噬的关系,探究自噬在VZV感染过程中的发挥的生物学功能并阐明其发生机制。方法1.构建VZV感染豚鼠背根神经节模型:感染组豚鼠静脉注射VZV感染的单个核细胞,对照组则注射等量未经VZV感染的单个核细胞。14天后,采集外周血及解剖豚鼠取其背根神经节组织。通过PCR法检测血液中VZVDNA,透射电镜观察背根神经节组织中的VZV病毒颗粒,Western blot法及免疫组化法检测VZV IE62蛋白是否表达。2.探索自噬对VZV感染豚鼠模型中病毒潜伏状态及其相关蛋白表达的影响:取32只4～6周龄雌性Hartley豚鼠,以未经处理的豚鼠8只作为空白对照组,根据是否进行自噬干预将感染病毒的豚鼠24只随机分为3组,每组8只:无处理组、自噬抑制组及自噬诱导组。14天后解剖豚鼠背根神经节,透射电镜观察病毒颗粒形态及自噬小体形态及数目,Western blot检测及自噬蛋白（BECN1、P62）及病毒相关蛋白（IE62、NCP蛋白）表达。结果1.通过静脉注射VZV感染的单个核细胞以感染豚鼠,14天后可在豚鼠外周血中检测到VZVDNA,在背根神经节组织中观察到未成熟病毒颗粒,并检测到相应的VZV蛋白的表达。2.在透射电镜下观察到背根神经节中的自噬囊泡并通过western印迹检测到自噬相关蛋白的表达,使用自噬干预药物处理后发现,与无药物处理组相比,自噬抑制组中VZV相关蛋白表达明显受到抑制,而自噬诱导组中VZV蛋白表达则未表现出明显差异。结论1.VZV感染的豚鼠单个核细胞静脉注射可构建VZV-DRG豚鼠感染模型;2.证实了 VZV感染豚鼠DRG后自噬的发生;通过抑制自噬水平,VZV病毒结构及功能蛋白的表达下降,可能影响其病毒生物合成,为研发靶向水痘-带状疱疹病毒感染相关神经症状的药物提供了新思路。
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