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目的：研究胚胎玻璃化冷冻对胎鼠及胎盘H19/Igf2印记基因差异甲基化区(DMD)甲基化状态及相关基因表达的影响。方法：实验分为A、B、C三组,以正常生育期封闭群的ICR品系雌雄小鼠合笼获得的14天胎龄的胎鼠及胎盘作为A组(第一对照组)；以经过促排卵、体外授精、体外培养及胚胎移植至假孕母鼠后获得的14天胎龄的胎鼠及胎盘作为B组(第二对照组)；以经过促排卵、体外授精、体外培养、胚胎冷冻复苏后移植至假孕母鼠后获得的14天胎龄的胎鼠及胎盘作为C组(实验组)。对获得的所有胎鼠及胎盘提取基因组DNA及总RNA。基因组DNA经亚硫酸盐变性处理,使非甲基化的C碱基变为U碱基而甲基化的C碱基则不变,然后经克隆测序分析H19/Igf2DMD的甲基化状态；通过实时定量RT-PCR对H19及Igf2基因的RNA进行定量,比较冷冻前后的变化。结果：A组中共获得5只孕鼠,51只胎鼠及胎盘。假孕母鼠进行胚胎移植成功的孕鼠共有10只,最终获得B组胎鼠及胎盘53只,C组胎鼠及胎盘50只。A组、B组及C组胎鼠基因组DNA中H19/Igf2 DMD区高甲基化率分别为51.4%±1.13%、37.79%±0.76%及20.16%±0.97%,与A组相比,B组及C组胎鼠基因组DNA中均有明显的甲基化丢失(P<0.05),而C组中丢失更严重(P<0.05);三组胎盘基因组DNA中H19/Igf2 DMD区高甲基化率分别为53.24%±1.11%、32.49%±1.24及36.87%±0.97%,与A组相比,C组与B组胎盘中也存在明显的甲基化丢失(P<0.05),但后两者相比差异无统计学意义(P>0.05)。三组胎鼠中H19△△Ct值分别为0.00±0.41、-3.53±0.43及-1.77±0.32,相对表达量分别为1.04±0.16、8.01±0.15及2.2±0.12,与A组相比,B组及C组胎鼠中H19基因表达量均明显增多(P<0.05),C组中增多程度低于B组(P<0.05);三组胎盘中H19△△Ct值分别为0.00±0.37、2.44±0.56及3.79±0.81,相对表达量分别为1.13±0.11、0.23±0.13及0.08±0.17,与A组相比,B组及C组胎盘中H19表达量明显减少(P<0.05),C组中减少更严重(P<0.05)。三组胎鼠中Igf2△△Ct值分别为0.00±0.29、2.01±0.43及1.21±0.24,相对表达量分别为1.07±0.11、0.30±0.03及0.56±0.08,与A组相比,B组及C组胎鼠中Igf2基因表达量均明显减少(P<0.05),C组较B组则明显增多(P<0.05),但低于A组；三组胎盘中Igf2△△Ct值分别为0.00±0.37、-1.48±0.23及-1.69±0.45,相对表达量为1.02±0.18、2.92±0.03及3.14±0.04,与A组相比,C组与B组胎盘中Igf2基因表达量明显增多(P<0.05),而后两者相比Igf2表达量则变化不大(P>0.05)。结论本研究结果提示小鼠胚胎的玻璃化冷冻复苏过程会加重体外授精等操作引起的植入后胎鼠基因组DNA中H19/Igf2 DMD的甲基化丢失,而对H19及Igf2基因表达量变化有一定改善作用；小鼠胚胎玻璃化冷冻过程对胎盘基因组DNA中H19/Igf2 DMD甲基化及Igf2基因表达量影响不大,但会加重体外授精等操作引起的H19基因表达减少。