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大豆花叶病毒(Soybean Mosaic Virus, SMV)病是一种世界性的大豆病害,严重影响大豆的产量和品质。病毒的采集、保存和株系鉴定不仅是病毒本身研究的基础,同时也为大豆抗病育种和抗性鉴定提供了依据。以往我国学者对我国的大豆产区的SMV进行了大量的采集,并进行了株系鉴定,确立了各个大豆产区的流行株系,为大豆的抗病育种提供了技术支撑。SMV株系在长期保存过程中可能发生意外丢失、混杂以及生物学特性的改变。不断重复的繁殖也消耗大量的人力物力。寻求一种操作简便而又可长期保持病毒活力的保存方法一直是有关研究者追求的目标。另外,王修强等多个研究者在对我国东北、黄淮地区SMV株系鉴定时,对安徽大豆产区的SMV株系也曾进行分析,但随着时间的推移以及大豆品种的更替,SMV株系可能发生变化。因此,本文开展了SMV不同保存方法的研究,以寻找适合SMV短期和长期保存的方法;并对安徽省北部大豆产区田间SMV株系变化情况进行跟踪调查。主要结果如下:(1)SMV常温、低温和超低温保存研究SMV在25℃、30℃、35℃保存环境下,不经过干燥处理的病样病毒的存活时间为5-6天,经过干燥处理的病样病毒的存活时间为8-9天。4℃保存环境下,不经过干燥处理的SMV存活时间为13天,经过干燥处理的病样保存15天后,发病率为40%左右。-20℃、-40℃、-80℃和-196℃不同保存方式比较表明,液氮保存效果最佳,-80℃、-196℃下保存15个月,发病率仍可达到80%,因此,它可作为长期保存SMV的保存方式。-20℃下保存1个月和-40℃下7个月时,发病率仍可达到75%,因此,它可作为短期内保存SMV的方式。三种保存温度下(-20℃、-40℃、-80℃)干燥处理的保存效果明显好于不经过干燥处理的保存效果。(2)组织培养保存SMV研究以侵染SMV的南农1138-2叶片为外植体进行组织培养,研究SMV的保存效果。结果表明,被感染的大豆叶片在MS培养基上可以产生愈伤组织。培养15天和25天后,利用愈伤组织块进行接种鉴定的发病率为100%。不同浓度的植物激素对愈伤组织的诱导效果差异明显。NAA和6 BA的浓度分别为0.2 mgl-1和2.0 mg-1时诱导效果最好。(3)安徽北部大豆产区SMV株系调查2009年在安徽北部的14个县市田间采集SMV大豆病叶样品208份,经过初步繁殖鉴定、单斑分离纯化、血清学检测,得到20份SMV分离物。采用王修强-杨雅麟-战勇(WYZ)等建立的鉴别寄主体系的10个大豆材料(南农1138-2,诱变30,8101,铁丰25,Davis, Buffalo,早熟18,Kwanggyo,齐黄1号,科丰1号)作为鉴别寄主。根据20个分离物在10个鉴别寄主上的症状反应结果划分株系。结果表明,跟安徽流行株系SC3、SC7、SC8类似分离物的分别占20%、30%和10%,说明安徽大豆花叶病毒流行株系没有发生大的变化。