本论文利用噬菌体表面展示技术(phage display technology, PDT)筛选能与人血清白蛋白(HSA)结合的肽段,欲将此类多肽插入到蛋白质药物上,提高蛋白质药物在血清中的半衰期,从而达到长效的目的。噬菌体表面展示技术是一种对多肽功能非常有效的筛选技术,即将外源蛋白分子或多肽的基因克隆到丝状噬菌体基因组中,与噬菌体外膜蛋白融合表达,展示在噬菌体颗粒的表面。由于外源蛋白或多肽的基因型和表型统一在同一噬菌体颗粒内,因此,通过表型筛选就可以获得它的编码基因。被筛选的噬菌体库还可以在大肠杆菌中进行在扩增,从而可以进行连续多轮迭代选择,得到高亲和力序列。实验中以人血清白蛋白为靶分子,利用噬菌体人工肽库技术从Ph.D.-7肽库中筛选出与其特异性结合的多功能肽段。将噬菌体表面展示肽库与用人血清白蛋白包被的微孔共同孵育,洗去未结合的噬菌体,再用洗脱液洗脱特异性结合的噬菌体。被洗脱的噬菌体进行扩增,然后进行下一轮的结合/扩增,经过2-3轮淘选后,对所得单克隆进行DNA序列测定。淘洗过程中的筛选标准是回收率和选择比。回收率是洗脱得到的噬菌体量与投入的噬菌体量的比值；选择比(P/B)是HSA包被板与对照空白板上洗脱噬菌体量的比值。实验中,如果这两个筛选系数明显增加,则可得到阳性克隆。为了获得较好的洗脱效果,比较两种不同的洗脱方法,一种方法是甘氨酸-盐酸(pH2.2)进行洗脱；另一种方法是用竞争性洗脱液(HSA靶蛋白溶液)进行洗脱。最后,挑取选择比较高的5个阳性克隆进行DNA序列测定。人血清白蛋白(HSA)是药物设计中理想的长效化载体蛋白,可用于改善药物的半衰期。与人血清白蛋白融合或者与人血清白蛋白黏附都已成为改善蛋白质药物药代动力学特性的策略。本论文对二者进行比较发现,尽管融合HSA的蛋白质药物在体内的半衰期大大延长,但其生物活性明显下降,然而黏附HSA的蛋白质药物的生物活性基本不变,同时半衰期明显延长。