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白血病细胞的迁移是其发生浸润的关键步骤，基质细胞衍生因子-1(SDF-1)能通过引发相应的信号通路引起细胞迁移，细胞迁移过程与细胞骨架的变化密切相关，而RhoGTP酶主要调控肌动蛋白细胞骨架，因此本论文研究RhoGTP酶家族的主要成员Rho在SDF-1引起的白血病细胞迁移过程中的作用。本论文首先用不同浓度的SDF-1（0、25、50、100和200ng/ml）刺激Jurkat细胞，Transwell实验观察细胞迁移情况;接着用细胞骨架的抑制剂处理Jurkat细胞，验证细胞迁移与细胞骨架的关系;随后激光共聚焦显微镜观察和流式细胞术检测SDF-1刺激Jurkat细胞后细胞骨架的变化情况。在此基础上，研究细胞内重要信号效应分子ROS和NO在SDF-1引起的Jurkat细胞迁移过程中的作用。首先SDF-1刺激Jurkat细胞后，流式细胞术检测ROS的产生情况，酶标仪检测NO的产生情况;接着探究ROS和NO是否参与SDF-1诱导的Jurkat细胞骨架的变化和细胞迁移;随后用Rho的抑制剂处理Jurkat细胞，检测SDF-1刺激后ROS和NO的产生与Rho的关系;然后研究Rho是否参与SDF-1引起的Jurkat细胞骨架变化和细胞迁移;Western Blot实验进一步检测SDF-1刺激Jurkat细胞后，RhoA、RhoB和RhoC的活化情况;最后siRNA转染干涉RhoA和RhoC的表达，Transwell实验研究RhoA和RhoC是否都参与SDF-1引起的Jurkat细胞迁移。另外，为了进一步研究RhoA和RhoC在SDF-1引起的Jurkat细胞迁移过程中的作用，将它们的抑制因子RhoGDI2进行干涉，荧光显微镜观察Jurkat细胞的侵染效率、Western Blot鉴定RhoGDI2shRNA在Jurkat细胞内的表达情况。 实验结果如下: 1.SDF-1通过改变细胞骨架的重排和聚合参与Jurkat细胞迁移 SDF-1引起的Jurkat细胞迁移具有浓度依赖效应，随着浓度的增大，迁移现象越明显;细胞松弛素B预处理Jurkat细胞，SDF-1刺激4h，细胞迁移现象极显著地受到抑制;SDF-1刺激4h，Jurkat细胞骨架发生重排和聚合。 2.ROS和NO通过改变细胞骨架的重排和聚合参与SDF-1引起的Jurkat细胞迁移 SDF-1刺激Jurkat细胞0、1、2、3和4h，细胞内ROS和NO的表达水平在4h时极显著地高于对照组;NAC和L-NMMA预处理Jurkat细胞，SDF-1刺激4h，细胞骨架的重排和聚合现象以及细胞迁移现象都极显著地受到抑制。 3.RhoA和RhoC通过改变细胞骨架的重排和聚合参与SDF-1引起的Jurkat细胞迁移 CT04预处理Jurkat细胞，SDF-1刺激细胞4h，极显著地抑制了ROS和NO的表达、细胞骨架的重排和聚合以及细胞迁移;Jurkat细胞内只表达RhoA和RhoC，不表达RhoB;SDF-1刺激4h，RhoA和RhoC都发生活化;RhoA和RhoC都参与SDF-1引起的Jurkat细胞迁移;构建质粒RhoGDI2shRNA，包装病毒并侵染Jurkat细胞，RhoGDI2sh1和sh2均能显著降低Jurkat细胞内RhoGDI2的表达量。 由以上研究结果得出如下结论: 1.SDF-1可以引起Jurkat细胞发生迁移、细胞骨架发生重排和聚合，并且通过改变细胞骨架的重排和聚合参与SDF-1引起的Jurkat细胞迁移。 2.SDF-1可以引起Jurkat细胞内ROS和NO的产生，ROS和NO通过改变细胞骨架的重排和聚合参与SDF-1引起的Jurkat细胞迁移。 3.SDF-1引起Jurkat细胞内ROS和NO的产生依赖于Rho的活化，SDF-1刺激后可使Jurkat细胞内RhoA和RhoC活化，并且RhoA和RhoC通过改变细胞骨架的重排和聚合参与SDF-1引起的Jurkat细胞迁移。构建的RhoGDI2shRNA慢病毒表达质粒成功侵染Jurkat细胞并抑制了RhoA和RhoC调控因子RhoGDI2的表达。 本论文着重研究Rho在SDF-1引起的Jurkat细胞迁移中的作用，阐明了此过程中的相关信号通路，为研究SDF-1引起的急性淋巴细胞白血病细胞迁移机制提供了可靠的理论依据，为治疗白血病提供了新的作用靶点。