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研究背景系统性红斑狼疮(SLE)是一种严重危害人群健康的自身免疫性疾病,该病临床表现复杂,病程迁延,其治疗至今是世界难题。中医药治疗SLE能明显改善症状,减轻免疫抑制剂的毒副作用,延长患者的生命,其疗效已受到重视。中医药防治SLE的特色在于辨证论治,而证候是辨证论治的基础,是连接中医理论和临床诊疗体系的桥梁和关键。因此对SLE的中医证型进行研究,可以为中医药治疗用药提供理论依据。SLE的发病机制尚未完全明了,细胞免疫异常是发病机制中的主要环节,尤其是T淋巴细胞质和量的变化在SLE发病中的作用十分重要。T淋巴细胞是机体的主要免疫活性细胞,测定T细胞核仁组织区嗜银蛋白(Ag-NORs)的表达可知T淋巴细胞的免疫活性。Ag-NORs早期的研究主要集中于肿瘤病人的检测上,近年有人将其应用在自身免疫病中,对SLE患者T淋巴细胞增殖活性分析发现,SLE初发病时T淋巴细胞Ag-NORs含量比正常对照高,提示T淋巴细胞增殖活跃。CD8~+调节性T细胞(CD8~+Ts)是一种抑制性免疫调节细胞,其表型特征为CD8~+CD28~-。已发现在多种自身免疫性疾病中,患者体内存在CD8~+抑制性T细胞数量减少或功能损伤。对SLE患者CD8~+调节性T细胞亚群在外周血的分布研究提示,患者体内CD8~+调节性T细胞亚群比例增高与病情活动的控制有关。目前SLE中医证型的研究尚无这方面的报道,本课题从免疫学角度探讨外周血CD8~+调节性T细胞和T细胞Ag-NORs含量与中医证型的关系,为中医治疗SLE提供理论和临床依据。目的检测SLE不同中医证型外周血CD8~+调节性T细胞比例和T细胞Ag-NORs含量,探索它们与SLE中医证型之间的关系。方法根据美国风湿病学会(ACR)1997年的SLE分类标准,选择40例SLE患者(女38例,男2例)进行观察,并按照中医辨证分型标准将其分为热毒炽盛和肝肾阴虚组2组;选择健康志愿者20例(女19例,男性1例)为对照组,运用流式细胞术(FCM)检测CD8~+CD28~-、CD8~+CD28~+T细胞亚群比例,用银染试剂及计算机图像分析系统测定T淋巴细胞Ag-NORs含量,同时收集各组基本的临床资料(SLEDAI、补体、免疫球蛋白、CRP)。结果1、外周血CD8~+CD28~-T细胞亚群的比较中,各组总体比较具有显著性差异(F=15.757,P<0.001),SLE两证型热毒炽盛组(25.51±7.69%)、肝肾阴虚组(31.00±10.76%)的CD8~+CD28~-T细胞比例显著高于健康对照组(15.66±6.98%)(P<0.001),肝肾阴虚组的CD8~+CD28~-T细胞比例显著高于热毒炽盛组(P<0.05)。外周血CD8~+CD28~+T细胞亚群的比较中,各组总体比较具有显著性差异(F=6.938,P=0.002),热毒炽盛组的(9.36±3.27%)CD8~+CD28~+T细胞比例显著低于健康对照组(12.99±2.64%)(P=0.01),而肝肾阴虚组和健康对照组、肝肾阴虚组和热毒炽盛组之间两两比较无统计学意义(P>0.05)。2、外周血T细胞Ag-NORs含量的比较中,各组总体比较具有显著性差异(F=8.417,P=0.001)。肝肾阴虚组(10.51±2.86%)和健康对照组(8.86±2.18%)的Ag-NORs含量显著低于热毒炽盛组(12.38±3.29%)(P<0.05,P<0.001),而肝肾阴虚组和健康对照组比较无统计学意义(P>0.05)。3、SLE中医证型间临床指标的比较中,热毒炽盛组的SLEDAI、IgG、CRP水平(10.63±3.09;24.07±6.63g/L;24.93±8.51mg/L)均显著高于肝肾阴虚组(5.25±2.93;14.30±7.46g/L;12.83±6.43mg/L)(P<0.001),热毒炽盛组的补体C3、C4水平(0.46±0.23g/L;0.07±0.05g/L)均显著低于肝肾阴虚组(0.70±0.28g/L;0.20±0.10g/L)(P<0.01;P<0.001),热毒炽盛组和肝肾阴虚组的IgA水平比较无统计学意义(P>0.05)。4、CD8~+CD28~-、Ag-NORs与临床指标之间的相关性分析中,CD8~+CD28~-与C3呈显著正相关(r=0.330,P=0.037)、与CRP呈显著负相关(r=-0.325,P=0.041),Ag-NORs与SLEDAI、IgG呈显著正相关性(r=0.325,P=0.040;r=0.347,P=0.028)、与C4呈显著负相关(r=-0.403,P=0.010)。Ag-NORs与CD8~+CD28~-之间无相关关系(r=0.071,P=0.664)。结论1、SLE热毒炽盛型和肝肾阴虚型间CD8~+CD28~-、Ag-NORs比较差异显著,表明CD8~+CD28~-、Ag-NORs的变化与SLE中医证型具有一定相关性,可以作为热毒炽盛型和肝肾阴虚型辨证的参考指标。2、SLE热毒炽盛型和肝肾阴虚型间SLEDAI、C3、C4、IgG及CRP比较差异显著,表明上述指标可作为热毒炽盛型和肝。肾阴虚型辨证的参考指标。3、外周血T细胞Ag-NORs含量与疾病活动性评分(SLEDAI)有明显正相关关系,可作为病情活动程度的指标。