利用肿瘤组织过量产生基质金属蛋白酶(MMP)以及家蚕丝素可以用于药物载体的特性，本实验将MMP酶切位点插入重组的丝素重链基因中，构建新的质粒，并在原核细菌中进行表达，在原核表达的基础上对含有基质金属蛋白酶酶切位点的重组重链丝素作为药物载体的可行性进行了初步研究。　　 PiggyBac转基因载体系统作为高效的昆虫转基因载体在昆虫转基因操作方面被大量运用。本实验利用PiggyBac载体，通过显微注射技术，将重组丝素重链基因导入家蚕基因组，进而产生带有重组丝素重链基因的家蚕新品种。经基因工程改造的家蚕产生的丝素蛋白将来可以用于药物载体等医用新材料的研究。　　 结论:　　 1、以菁松基因组的DNA为模板，通过设计引物、PCR扩增、连接等方法，获得重组丝素重链基因，进而成功构建了四种原核表达质粒、四种真核表达质粒和四种PiggyBac转座子载体;　　 2、利用BL21细菌表达了构建的pGEX系列原核表达载体上携带的重组基因，通过SDS-PAGE检测到蛋白已经表达，并对四种蛋白的可溶性作了分析，确定合适的诱导表达条件:BFib H-site和BFib H-GS-site表达的合适条件为IPTG0.6mM，温度为27℃，培养时间为15h; BFib H-site-EGFP和BFibH-GS-site-EGFP表达的合适条件为IPTG0.3mM，温度为16℃，培养时间为20h;　　 3、利用GST beads对表达的蛋白BFib H-GS-site-EGFP进行纯化，Western Blot检测到蛋白已经表达;同时对表达的蛋白可酶切条件进行了摸索，初步确定了实验所需的酶切体系:2.5mM substrate peptide4μl、5×Assay Buffer-2(50mMTris-HCl;750mM NaCl;25mM CaCl2;5μM ZnCl2;0.05％ Brij-35; PH7.6)20μl、0.1μg/μl MMP-21μl和纯净水75μl，37℃水浴2.5h;　　 4、利用显微注射的方法将PiggyBac转座子载体转入家蚕卵内，观察了蚕发育中各个阶段的表型，通过观察蚕蛾眼部对转基因家蚕是否成功进行初步鉴定，经基因组PCR以及测序鉴定比较后证明转基因处理后的家蚕体内含有了重组的丝素重链基因，因此，本实验成功地构建了含有MMP-2酶切位点的重组丝素重链的家蚕，为后续家蚕转基因及重组重链丝素作为药物载体的深入研究打下了基础。