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目的:慢性胰腺炎(Chronic Pancreatitis,CP)是各种因素(如酗酒、吸烟、损伤和遗传因素等)导致的一种不可逆转的慢性炎症刺激,主要表现为大量成纤维细胞增生和细胞外基质(Extra-cellular matrix,ECM)在胰腺内沉积导致腺泡细胞受损和胰腺进行性纤维化。胰腺萎缩、钙化、导管狭窄和间质纤维化为CP常见的病理表现,其病程迁延、预后不良,严重影响患者的生活质量。近年来我国CP发病率呈逐渐上升的趋势,然而现阶段对于CP患者的临床治疗主要以缓解症状及控制并发症为主,欠缺针对其病因的治疗,因此治疗效果不佳。故进一步探究CP发生发展的分子机制能为CP的治疗提供潜在的方向。ECM过度沉积是CP的关键步骤,而胰腺星状细胞(Pancreatic stellate cell,PSCs)的活化被认为是CP纤维化发生的核心事件。核转录因子-κB(Nuclear factor kappa-B,NF-κB)是一种参与炎症反应的核蛋白因子,p65作为其主要的功能亚基发挥重要作用,近年来对其参与CP的研究越来越受到重视。E3泛素连接酶,斑点型锌指结构蛋白(Speckle-type POZ protein,SPOP)可以特异性泛素化降解胞内蛋白,在肿瘤的发生及转移、骨骼发育等多种病理生理过程中都发挥着重要的作用,然而其在CP中的生物学作用尚不清楚。因此,本研究旨在探讨SPOP在CP中的表达变化,并探讨其对小鼠PSCs活化的影响。方法:1、动物水平分析SPOP及NF-κB在慢性胰腺炎中的表达:构建雨蛙素诱导的小鼠慢性胰腺炎模型,通过IHC、WB、qRT-PCR检测胰腺组织中相关纤维化蛋白及炎症因子的表达情况,并检测SPOP蛋白及NF-κB/p65蛋白的表达情况;2、细胞水平分析SPOP调控p65对PSCs活化的影响:分离小鼠胰腺星状细胞,通过siRNA转染下调SPOP的表达,并通过细胞增殖实验、细胞划痕实验、Transwell实验、WB实验来检测siSPOP对于PSCs增殖和迁移的影响;3、SPOP与FADD之间的相关性:通过Co-IP和WB证明两者在PSCs活化过程中的关系;4、SPOP抑制PSCs的作用是否依赖于FADD的下调:使用siRNA下调FADD的表达,并分析FADD低表达对于SPOP介导的PSCs增殖和迁移的影响。结果:1、小鼠慢性胰腺炎模型中胰腺重量显著下降、组织纤维化改变明显、SPOP表达下调,而NF-κB/p65、IL-6及α-SMA、胶原蛋白(Col1a1、Col3a1)和TIMP1的表达上调;2、抑制SPOP可促使PSCs表达更加丰富的α-SMA、ECM及EMT蛋白,并促进了其在体外的增殖和迁移;3、下调SPOP的表达可以减少PSCs激活过程中FADD的降解,SPOP的低表达与FADD的高表达密切相关;4、FADD的下调强烈抑制了siSPOP对PSCs增殖、迁移的促进作用,同时恢复了ECM蛋白质(α-SMA、Col1a1)、EMT蛋白(Vimentin)、NF-κB/p65、IL-6的表达水平。结论:1、在小鼠CP模型的胰腺组织中,SPOP低表达;2、SPOP通过介导FADD的泛素化/降解部分抑制NF-κB(p65)/IL-6通路,从而抑制PSCs的增殖、迁移,并参与慢性胰腺炎的进程;