【摘 要】
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目的探讨柚皮苷（Naringin,NG）对低温条件下小鼠运动耐力、肌肉损伤的保护作用及可能机制。为低温条件下减轻肌肉损伤,改善运动能力提供新的实验证据;也为富含柚皮苷的食品资源开发提供科学依据。方法雄性C57BL/6J小鼠40只,随机分为常温安静对照组（Ctrl组）、低温运动组（LE组）、50 mg/kg柚皮苷+低温运动组（50NG组）、100 mg/kg柚皮苷+低温运动组（100NG组）。灌胃干
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目的探讨柚皮苷（Naringin,NG）对低温条件下小鼠运动耐力、肌肉损伤的保护作用及可能机制。为低温条件下减轻肌肉损伤,改善运动能力提供新的实验证据;也为富含柚皮苷的食品资源开发提供科学依据。方法雄性C57BL/6J小鼠40只,随机分为常温安静对照组（Ctrl组）、低温运动组（LE组）、50 mg/kg柚皮苷+低温运动组（50NG组）、100 mg/kg柚皮苷+低温运动组（100NG组）。灌胃干预4周。每周2次适应性跑步训练;每周监测小鼠体重变化情况。通过低温（4±1）℃跑台实验,记录小鼠运动力竭时间。采用ELISA法检测生化指标,包括疲劳和损伤指标:血清乳酸（LA）、乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）和尿素氮（BUN）;能量代谢指标:肌肉组织三磷酸腺苷（ATP）;氧化应激指标:血清丙二醛（MDA）,肌肉组织超氧化物歧化酶（SOD）。利用HE染色和透射电镜观察骨骼肌组织形态和超微结构。运用Western blot检测AMPK/SIRT1/PGC-1α信号轴蛋白表达。RT-qPCR技术检测PGC-1α下游线粒体生物发生（NRF1、TFAM）和抗氧化相关基因（NRF2、SOD1、HO-1和GCLC）mRNA表达水平。使用SPSS 25.0软件进行统计分析,多组间均数比较用方差分析,检验水平α=0.05。结果1.NG干预前后,各组间小鼠体重无明显差异。与LE组相比,100NG组延长低温下小鼠跑步力竭时间,差异有统计学意义（P＜0.05）。2.NG降低低温力竭小鼠疲劳和损伤指标。与Ctrl组相比,LE组小鼠血清LA、LDH、CK和BUN升高,差异有统计学意义（P＜0.05）;NG干预降低LA、LDH、CK和BUN水平,100NG组干预效果最明显,差异有统计学意义（P＜0.05）。3.NG改善低温力竭小鼠氧化应激水平。与Ctrl组相比,LE组小鼠氧化应激水平升高,血清MDA水平升高、腓肠肌和比目鱼肌SOD活性降低,差异有统计学意义（P＜0.05）;与LE组相比,NG补充降低血清MDA水平,提高腓肠肌和比目鱼肌SOD活性,差异有统计学意义（P＜0.05）。4.NG改善低温力竭小鼠肌肉能量代谢。与Ctrl组相比,LE组腓肠肌和比目鱼肌组织ATP酶活性降低,差异有统计学意义（P＜0.05）;与LE组相比,100NG组干预上调腓肠肌和比目鱼肌组织ATP酶活性,差异有统计学意义（P＜0.05）。5.NG对低温力竭小鼠肌肉和肌原纤维具有保护作用。HE染色和透射电镜发现,NG改善低温力竭所致的肌肉纤维排列紊乱、连接断裂和肌细胞破裂;减少肌原纤维排列紊乱、稀疏和断裂。6.NG激活低温力竭小鼠肌肉AMPK/SIRT1/PGC-1α信号轴。通过WB实验发现,与Ctrl组比较,LE组小鼠腓肠肌和比目鱼肌中pAMPK/AMPK、SIRT1和PGC-1α表达水平降低,差异有统计学意义（P＜0.05）;与LE组相比,NG干预上调低温力竭小鼠pAMPK/AMPK、SIRT1和PGC-1α的表达水平,差异有统计学意义（P＜0.05）。7.NG上调PGC-1α下游线粒体生物发生相关因子mRNA的表达。与Ctrl组比较,LE组小鼠腓肠肌和比目鱼肌中NRF1和TFAM因子mRNA表达受到抑制,差异有统计学意义（P＜0.05）;与LE组比较,NG上调低温力竭小鼠腓肠肌和比目鱼肌中NRF1和TFAM因子mRNA表达,100NG组干预效果明显,差异有统计学意义（P＜0.05）。8.NG上调抗氧化应激相关因子mRNA的表达。与Ctrl组比较,LE组小鼠腓肠肌和比目鱼肌中NRF2、SOD1、HO-1和GCLC因子mRNA表达受到抑制,差异有统计学意义（P＜0.05）;与LE组比较,柚皮苷上调低温力竭小鼠腓肠肌和比目鱼肌NRF2、SOD1、HO-1和GCLC mRNA的表达水平,100NG组干预效果明显,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论柚皮苷能够改善低温运动小鼠抗氧化水平与肌肉组织能量代谢,提高小鼠运动耐力,减轻肌肉损伤,其改善作用机制可能与肌肉组织AMPK/SIRT1/PGC-1 α-NRF 1/NRF2 信号通路的激活有关。
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