【目的】本研究通过构建p^IRES-p21^wafl真核表达载体,利用脂质体介导的基因转染技术导入乳腺癌细胞系MCF-7,并得到稳定的表达。检测转染前后癌细胞的增殖能力,分析乳腺癌细胞周期的变化,为乳腺癌的基因水平诊断和治疗提供新的方法。【方法】通过脂质体介导法将构建的pIRES-p21^wafl真核表达载体,转染到人乳腺癌细胞系MCF-7中,使其在基因水平上得到稳定的表达。分别应用实时荧光定量PT-PCR技术检测基因表达、Western免疫印迹法检测蛋白表达,MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测乳腺癌细胞周期分布及变化情况。【结果】p21^wafl基因转染后乳腺癌细胞生长显著受抑制,细胞周期于G₁期受到阻滞,经检测,基因转染组的G₁期、S期和G₂/M期细胞比例为（76.32±2.11）%、（18.18±1.37）%、（8.92±0.48）%,未转染组则为（50.23±1.06）%、（34.72±1.25）%、（13.52±1.24）%,二者比较有显著差异,计算的P值分别＜0.01、＜0.05、＜0.05。【结论】通过p21^Wafl基因转染的方式能抑制人乳腺癌细胞周期演进和增殖活性,从而减少乳腺癌的发生发展,不失为乳腺癌治疗的一种新方式。