论文部分内容阅读
目的：本实验旨在通过研究骨髓间充质干细胞移植联合EPO治疗脓毒症大鼠心肌损伤，观察其对心肌细胞病理学改变及细胞凋亡的影响，探讨EPO联合骨髓间充质干细胞移植对脓毒症大鼠心肌细胞凋亡的抑制作用及可能的分子生物机制，从而为临床治疗脓毒症相关性心肌损伤提供新思路。 方法：模型建立：SD大鼠50只，雌雄不拘，随机分为5组，每组各10只，应用盲肠结扎穿孔术建立脓毒症模型。单纯干细胞移植组（SC）、单纯促红细胞生成素组（EPO）、EPO联合SC组（EPO+SC）、脓毒症组（CLP），假手术组（sham）。SC组建模后尾静脉输注异体间充质干细胞。EPO+SC组建模后立即腹腔内注射EPO1000IU/kg并尾静脉输注异体间充质干细胞。EPO组模型复制后立即腹腔内注射EPO1000IU/kg，尾静脉输注相同容量的生理盐水。CLP组行盲肠结扎穿孔术，sham组开腹后不做任何处理，后仅尾静脉输注相同容量的生理盐水。检验指标：24小时后麻醉处死实验动物，取心肌标本。采用苏木精-依红（HE）染色观察心肌组织形态；采用TUNEL染色方法检测心肌细胞凋亡指数；用Western-blot方法检测心肌组织中凋亡蛋白Bax、Caspase-3，抗凋亡蛋白Bcl-2的表达量。 结果：HE染色：sham组可见心肌细胞排列整齐，心肌细胞结构完整；control组可见广泛心肌纤维断裂，排列紊乱，心肌细胞肿胀或皱缩，可见空泡变性;心肌间质血管充血、水肿，炎症细胞浸润；EPO组与SC组心肌梗死区心肌组织相似，炎性细胞浸润情况较轻，期间散在分布正常心肌细胞；EPO+SC组心肌细胞损害较轻，间质充血不明显，少量炎症细胞浸润。TUNEL结果：EPO+SC组凋亡指数显著低于CLP组（37.93±12.60％vs75.70±15.50%，p＜0.01），EPO组凋亡指数与EPO+SC组相比较高（54.08±16.06%vs37.93±12.60%，p=0.047），EPO组与SC组凋亡指数均低于CLP组（p＜0.01）。Western blot结果：EPO+SC组Bcl-2蛋白表达显著高于EPO组、CLP组及sham组（p＜0.01），Bax及Caspase-3蛋白表达量均减低（P<0.05）。 结论：骨髓间充质干细胞移植联合给予重组人促红细胞生成素在脓毒症相关性心肌损伤的治疗中可减轻心肌的病理学改变、抑制心肌细胞的凋亡，其机制可能是通过上调抗凋亡蛋白、下调凋亡蛋白的表达来实现的。