设施蔬菜产区及其周边环境水中烟草花叶病毒属病毒的检测与鉴定

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环境水中存在大量的植物病毒,环境水作为病毒传播的途径,在病害的发生、蔓延过程中具有潜在的威胁。本研究主要对设施蔬菜产区及周边环境水样进行检测,通过接种试验证明环境水中植物病毒的侵染性,以验证其进入病害循环的可能性。本研究的主要结果如下:1.对山东、江苏、河北、上海等地采集到的79份水样进行浓缩提纯、核酸提取、RT-PCR等一系列操作后,共检测出烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)、黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)、辣椒轻斑驳病毒(Pepper mild mottle virus,PMMoV)、番茄斑驳花叶病毒(Tomato mottle mosaic virus,ToMMV)4种植物病毒。在总样品中,有29份水样中检测出有植物病毒的存在,总检出率达36.7%。其中有22份水样中检测出CGMMV,检出率为27.8%;有7份样品中检测出PMMoV,检出率为8.9%;有2份样品中检测出TMV,检出率为2.5%;仅1份样品中检测出ToMMV,检出率为1.3%。2.不同地区植物病毒分布状况不同:在山东济南检测出CGMMV和ToMMV,在山东潍坊和临沂均检测出CGMMV和PMMoV;在河北大城检测到PMMoV和TMV;在山东菏泽检测到CGMMV和TMV;在山东泰安、聊城及江苏赣榆检测到CGMMV;在山东烟台、上海地区检测到PMMoV;在山东淄博地区没有检测到植物病毒。3.将浓缩得到的TMV、CGMMV、PMMoV浓缩液接种到烟草上,植株发病,说明水中植物病毒具有侵染性。4.将各地区得到的TMV、CGMMV、PMMoV分离物进行一致性分析并构建系统发育树。结果显示:TMV-HZ(MG763753)分离物与塞尔维亚40-11(KF184654)分离物的亲缘关系最近;TMV-HB(MG763752)分离物与中国云南HHGJ(KC572632)分离物亲缘关系最近;SDLY-FX(MG729801)分离物与山东泰安SDTA-2(MG729806)分离物亲缘关系最近;SDLC-3(MG729804)分离物与中国河南pXT1-CGMMV(KY753929)分离物亲缘关系最近;SDHZ-WL(MG729807)分离物、SDQZ-3(MG729805)分离物、江苏JS-4(MG729802)分离物与山东泰安SD Luffa(KJ754196)分离物亲缘关系较近;SHSJ2(MG729813)分离物与中国重庆PMMoV-CQ(KP955400)分离物亲缘关系最近;SDYT-ZY(MG729814)分离物与河北大城HBDC(MG729809)分离物亲缘关系最近;SDFX(MG729810)分离物、上海宝山SHBS-2(MG729808)分离物与山东SD60(KR261606)分离物亲缘关系较近;SDQZ5(MG729812)分离物、SHMH-4(MG729811)分离物与西班牙P95/25(FR671386)分离物亲缘关系较近。研究结果表明,植物病毒在环境水中有传播扩散的趋势。
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