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目的用非甾体类抗炎药布洛芬作用于肝癌细胞HepG2,观察其细胞增殖、凋亡的变化,并从分子水平研究布洛芬对肝癌细胞HepG2细胞的wnt/β-catenin信号通路的关键蛋白β-catenin及下游重要靶基因cyclin D1、c-myc的影响,探讨布洛芬抑制肝癌的可能分子机制,从而为临床上进一步应用此药物治疗肝癌奠定基础。方法体外培养HepG2细胞,以MTT法检测不同浓度布洛芬分别作用HepG2细胞24、48、96h后细胞增殖情况;应用RT-PCR检测布洛芬处理HepG2 48h后β-catenin、cyclin D1、c-myc转录水平的变化;western blotting检测布洛芬对HepG2中β-catenin蛋白表达量的影响;免疫细胞化学法观察布洛芬处理HepG2细胞后β-catenin的亚细胞定位;流式细胞仪检测布洛芬对HepG2细胞凋亡的影响。1结果0.7 mmol/L的布洛芬处理细胞48h后能明显见到细胞增殖受到抑制,抑制率达到53.8%±1.56%;RT-PCR结果显示布洛芬处理后细胞的β-catenin、cyclin D1、c-myc转录也受到显著抑制;Western印迹结果表明布洛芬处理组细胞中β-catenin蛋白表达低于未处理组;免疫细胞化学结果显示未处理组的β-catenin在细胞中主要定位于胞核,而布洛芬处理后β-catenin在胞核中定位减少,胞浆定位增多;流式细胞术结果显示布洛芬能诱导HepG2细胞凋亡。上述作用都有时间和剂量依赖性。结论1.布洛芬能显著抑制肝癌细胞HepG2的增殖,诱导其凋亡,且随着处理时间和药物浓度的增加,这种作用逐渐增强;2.布洛芬能影响肝癌细胞HepG2的形态,改变其贴壁属性,下调β-catenin基因和蛋白的表达,改变β-catenin的亚细胞定位,下调wnt/β-catenin信号通路下游重要靶基因cyclin D1、c-myc的转录;3.布洛芬引起肝癌细胞HepG2的的增殖与凋亡的改变可能与调控wnt/β-catenin信号通路,抑制下游相关靶基因的转录有关。