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先天性免疫是宿主抵抗病原入侵的一种重要的免疫防御机制，包括免疫细胞和先天性免疫分子。先天性免疫信号通路分子在免疫防御中发挥着重要的作用，主要包括TLR信号通路、NLR信号通路、RLR信号通路和CLR信号通路。TLR信号通路主要识别细胞外的原虫、病毒和细菌等病原，在抵抗病原入侵中发挥着重要作用。NLR信号通路主要识别胞内抗原，通过调控细胞因子的释放起到免疫防御作用。环形泰勒虫可侵入淋巴样细胞和红细胞的原虫，其裂殖体阶段具有转化宿主细胞的特性，业已证明主要寄生于B淋巴细胞、树突状细胞和巨噬细胞等免疫相关细胞。因此，研究环形泰勒虫裂殖体感染细胞TLR和NLR信号通路相关分子转录水平，不仅可以揭示环形泰勒虫对宿主细胞天然免疫功能的影响，而且对深入开展寄生虫致病、寄生虫诱导宿主细胞发生永生化等病原与宿主相互作用机制研究具有重要意义。本研究的主要结果如下: 1.Real-time PCR检测方法的建立:根据GenBank上发表的序列，针对牛的Toll样受体(TLR1-10)、NOD1、NOD2和IL6等分子设计了特异性引物，建立了48种Real-time PCR检测方法。实验结果显示:所建方法熔解曲线峰单一，在不同目标分子之间无交叉反应，特异性好;可检测1-100 copies/μL以上的重组质粒，敏感性好;组内重复变异系数低于3.52％，组间重复变异系数不超过3.92％。为进一步开展牛Toll样信号通路和NOD样受体信号通路相关分子的转录水平研究提供了技术和方法。 2.环形泰勒虫感染细胞Toll样受体和NOD样受体信号通路相关分子转录水平的检测与评价:采用所建立的Real-time PCR检测方法，以健康牛外周血淋巴细胞为对照组，对环形泰勒虫感染的TaXJ-1、TaNM和TaX J-23株淋巴细胞系的F10代次细胞的Toll样受体和NOD样受体信号通路上的48个分子的转录水平进行了检测。结果显示:TLR1-TLR10转录水平下调，差异极显著(P＜0.01)，其中TLR1、TLR5、TLR7和TLR10与其他受体相比下调十分明显; NOD1、NOD2、NAIP、NLRP1和NLRC4分子转录水平下调，差异极显著(P＜0.01)，NLRP3转录水平下调，差异显著(P＜0.05)，其中NAIP与其他受体相比下调十分明显，而NLRP1在实验组中很难检测到;Toll样和NOD样受体信号通路下游接头分子，细胞因子中仅IL6和IL1β转录上调，差异极显著(P＜0.01)，且IL6上调倍数比IL1β大，其余30个分子转录水平下调，差异极显著(P＜0.01)，其中ASC、IFNα、 NF-κB1和FOS与其他细胞因子和接头分子相比下调十分明显。该实验为深入研究环形泰勒虫对宿主细胞天然免疫功能的影响提供了数据。